Kvalitativ analys av PCR för hepatit C

Hepatit är en allvarlig sjukdom som har många orsaker. Grunden för dess utveckling är direkt eller indirekt skada på levern. Med tanke på dess betydelse för hela organismen kan man bara gissa hur svårt patologin är. I denna artikel kommer vi att undersöka mer detaljerat kursens egenskaper och laboratoriediagnos av hepatit C.

Orsaken till sjukdomen är ett viralt medel som refererar till RNA-innehållande patogener. Det har en särskiljande funktion - förmågan att mutera, det vill säga att ändra dess struktur. På grund av detta släpper infektionen immunsystemets attack och leder i de flesta fall till kronisk inflammation i levern.

Med tanke på förekomsten av olika subtyper av viruset bör valet av läkemedel baseras på resultaten av genotypning. Trots en lång studie av sjukdomen och funktionerna i HCV-strukturen har det ännu inte varit möjligt att utveckla ett specifikt vaccin för sjukdomen.

Svårigheterna med tidig diagnos ligger i den asymptomatiska förloppet av hepatit, vilket leder till att en person besöker en läkare vid cirrosförloppet. För att upptäcka en sjukdom i tid krävs regelbundna medicinska undersökningar. Endast genom laboratorietestning av blod är det möjligt att upptäcka HCV och förhindra infektion hos dem omkring dig. Faktum är att infektionsbäraren under lång tid inte kan gissa om patologin och fortsätta att överföra viruset till friska människor.

Vägar för överföring

I de flesta fall sprider viruset genom blodet, eftersom det innehåller den högsta koncentrationen av patogena ämnen. Sålunda överförs infektionen:

• med hemodialys
• med en infekterad nål;
• i kampsätt när huden skadas och blodkontakt uppstår
• med blodtransfusion (blodtransfusion).

Sannolikheten för infektion under intimitet är obetydlig, eftersom det finns ett litet antal patogener i semen och vaginal urladdning. Risken för infektion ökar avsevärt i strid med integriteten hos könsorganen. Detta observeras med aggressivt och analsex.

Vad gäller det vertikala sättet för överföring utförs det i arbetet. Under fostrets graviditet kan patogen inte tränga igenom placentan till embryot. Vid naturlig förlossning överförs det patogena medlet till barnet genom traumatisering av huden, när kontakt med moderns blod observeras.

Efter patogenens penetration till en hälsosam organism börjar syntesen av antikroppar, som är skydd mot infektion och hör till immunstrukturer. De finns i den inledande studien av en person som använder ELISA.

För att bekräfta diagnosen utsätts patienten för en polymeraskedjereaktion. Det är en analys av det genetiska materialet av ett patogent medel och bestämningen av viral belastning.

Laboratoriediagnos av hepatit C

Laboratoriediagnos börjar med en enzymimmunanalys. Dess huvuduppgift är att upptäcka antikroppar producerade mot patogenen. Dess effektivitet är nästan 95%. Tack vare denna forskning är det möjligt att identifiera virusbäraren i det prekliniska skedet och skicka det för vidare undersökning.

En kvalitativ analys av ELISA indikerar närvaron eller frånvaron av immunglobuliner i patientens blod. Dess resultat kan vara "positivt" eller "negativt". Efter att ha fått det första svaret skickas personen till nästa undersökning - PCR. Priset beror på kvaliteten på reagenserna och laboratoriet. Kostnaden för polymeraskedjereaktionen kan nå 4 tusen rubel.

PCR-funktioner

Med hjälp av en polymeraskedjereaktion tillåter även en liten mängd biologiskt material oss att uppskatta virusbelastningen i blodet, det vill säga att beräkna koncentrationen av patogener i en milliliter vätska.

Med tillkomsten av PCR har diagnosen hepatit blivit mycket enklare. Analysen gör det möjligt att identifiera HCV RNA, för att fastställa scenen för den infektiösa processen och infektiösheten hos virusbäraren.

Det finns flera typer av genetisk diagnos:

1. Kvalitativ analys av PCR för hepatit C - bekräftar närvaron eller frånvaron av HCV i patientens blod:
2. kvantitativ, genom vilken man kan beräkna koncentrationen av virus och fastställa sjukdomsstadiet. Resultatet ges i IE / ml eller kopior / ml (beroende på laboratoriet);
3. genotypning - nödvändigt för att bestämma genotypen för HCV. Detta krävs för korrekt val av droger som är mest effektiva i det här fallet. Analys indikerar indirekt svårighetsgraden av den patologiska processen i levern. Sålunda observeras i den tredje genotypen av patogenen oftast steatos, vars grund är ackumulationen av fett i hepatocyter (dess celler). Dessutom påverkar typen av virus utfallet och varaktigheten av den terapeutiska kursen.

Kvalitativ analys av PCR för hepatit C

För det första undersöks biologiskt material i laboratoriet för närvaro av HCV RNA. Det är viktigt att komma ihåg att en kvalitativ analys av hepatit C har en viss grad av känslighet och kan därför inte alltid ge rätt svar. I det här fallet rekommenderas att man genomgår laboratoriediagnostik med andra reagenser.

För att få tillförlitliga resultat ska testsystem med en känslighet av minst 50 IE / ml användas.

Det diagnostiska resultatet kan vara antingen "positivt" eller "negativt". Om patogenen inte finns i blodet, är studien avslutad. Om ett patogent medel detekteras i provet kvantifieras en virusbelastning.

Ett falskt negativt svar erhålls när processen bryts, till exempel aktiva komponenter som undertrycker byggandet av kopior av patogenet kommer in i mediet. Det är således inte möjligt att visa en sann blodbild, varför en persons infektion inte diagnostiseras.

Ett falskt positivt resultat kan erhållas om röret för insamling av biologiskt material såväl som miljön för studien var förorenad. Dessutom är ett sådant analyssvar möjligt när blandade infektioner, när levern påverkas av flera virus, till exempel hepatit C och D.

Indikationer för kvalitativ forskning

Läkaren kan ordinera en patient en kvalitativ studie om identifiering av RNA hos hepatit C-viruset:

• vid mottagande av ett positivt eller tvivelaktigt enzymimmunanalysrespons;
• för kontroll av diagnosen;
• bestämma viral belastning;
• sätta scenen av sjukdomen
• diagnos av blandad infektion. Hepatit C infekterar ofta levern samtidigt med "D" -viruset;
• bestämning av terapeutisk taktik med beaktande av orsaksmedlets genotyp;
• Bedömning av förändringsdynamik under behandling med antivirala läkemedel.

Fördelarna med polymeraskedjereaktionen innefattar:

1. tekniken med hög känslighet, vilket gör det möjligt att fastställa infektionsfaktorer i det prekliniska skedet;
2. identifiering av patogenens genetiska material, och inte dess antikroppar;
3. möjligheten att etablera en subtyp av ett patogent medel
4. hög diagnostisk hastighet, eftersom ingen sådd av materialet på näringsmediet krävs, och det är tillräckligt att använda specifika testsystem. En person får resultatet efter 5 timmar;
5. mångsidighet. Analysen tillåter att identifiera vilket genetiskt material som helst (RNA, DNA). Tack vare detta kan läkaren bekräfta hepatit C och andra typer av sjukdomen (B);
6. förmågan att upptäcka latent infektion.

Kvantitativ forskning

I studien av blod med användning av polymeraskedjan kan reaktionen beräkna antalet patogener i en fast volym biologiskt material. Indikatorn presenteras i IE / ml. Genom analys är det möjligt att bestämma graden av smitta hos patienten, bestämma scenen för den smittsamma processen och utvärdera effektiviteten av läkemedelsbehandling.

På grundval av PCR bestämmer specialisten vilka doser av läkemedel som kan blockera reproduktionen av patogener. Dessutom bestäms varaktigheten av antiviral behandling och prognos för livet. Det är viktigt att komma ihåg att testsystemen har hög känslighet, därför gör metoden det möjligt att bekräfta infektion hos en person i det prekliniska skedet.

genotypning

Med tanke på patogenens förmåga att mutera är dess genotyp nödvändig för att bestämma behandlingens taktik och valet av antivirala läkemedel. Till exempel varar behandlingen av HCV 1 48 veckor, med en positiv trend observerad endast i 60% av fallen. Genotyperna 2 och 3 har en mer fördelaktig prognos. Antivirala läkemedel ordineras i 8 månader, och deras effektivitet når 85%.

Enligt statistik är HCV 1, 2 och 3 i de flesta fall registrerade i Ryska federationen.

Vid avkodning av ett laboratorietest kan detta svar anges - "inte skrivet". Detta innebär att ett virus cirkulerar i patientens cirkulationssystem och kan inte erkännas av testsystemet. Resultatet av analysen i det här fallet indikerar att patogenen inte är typisk för ett visst geografiskt område.

Hur får man tillförlitliga resultat?

För att en kvalitativ studie av PCR för att detektera RNA hos orsaksmedlet för hepatit C visade de rätta resultaten är det nödvändigt att iaktta kraven för förberedelse för laboratoriediagnostik:

1. blodprovtagning utförs på tom mage och det "hungriga" gapet bör inte vara kortare än 8 timmar;
2. två dagar före studien rekommenderas att man slutar dricka alkoholhaltiga drycker och överger kryddiga, feta och röka rätter.
3. Avbryt införandet av droger som reducerar blodkoagulering, till exempel heparin. Om dessa läkemedel ordineras av hälsoskäl, måste du meddela läkaren. Dessutom bör specialisten vara medveten om att andra läkemedel tas emot, vilket kan påverka resultatet av laboratorieforskning.
4. Före insamlingen av biologiskt material bör fysioterapeutiska förfaranden inte utföras och utsättas för allvarlig fysisk ansträngning.

Resultaten av analysen kan påverkas inte bara av den person som donerar blod utan också av andra faktorer, nämligen:

• dålig kvalitet blodprovtagning;
• bristande överensstämmelse med rekommendationer om transport av biologiskt material
• otillräcklig utbildning av laboratoriearbetare
• bristande överensstämmelse med forskningsmetoden
• införande av antikoagulantia (heparin) på tröskeln till blodprovtagningen. Denna grupp av droger minskar koagulering och därigenom saktar reagensarbetet.

I olika laboratorier kan det diagnostiska svaret skilja sig något, men dessa fel påverkar inte slutresultatet av studien.

Särskild uppmärksamhet ägnas åt de typer av testsystem som används i laboratoriet. Ofta ges företräde för reagenser med hög känslighet. Detta är viktigt för patienter med låg viral belastning eftersom det är svårt att upptäcka.

Hur ofta utförs ett laboratorietest?

Primär polymeraskedjereaktion utförs hos människor som har detekterats genom immunanalys för antikroppar mot patogenen av hepatit. I det här fallet är det tilldelat att bekräfta infektionen hos en person och fastställa sjukdomsstadiet. Dessutom tillåter analysen att bestämma subtypen av viruset, vilket är särskilt viktigt för valet av läkemedel.

Nästa period för obligatorisk laboratorietestning är 3 månader från starten av antiviral terapi. Diagnostik gör det möjligt att utvärdera läkemedlets effektivitet, justera dosen eller ersätta dem.

Förutom basprov kan PCR dessutom utföras vid 4 och 24 veckor från början av behandlingen. En positiv prognos av sjukdomen bekräftas av en minskning av virusbelastningen efter tre månaders behandling. Till exempel bör den minska från 1 miljon IE / ml till flera hundra tusen.

Om koncentrationen av patogena ämnen i blodet kvarstår på samma nivå eller ökar något, indikerar detta ineffektiviteten hos antivirala medel och kräver ersättning. Användning av PCR vid slutet av behandlingen är det möjligt att bekräfta patientens återhämtning.

För att korrekt tolka resultaten av laboratoriediagnostik krävs samråd med en specialist på hepatolog eller infektionssjukdom. Med tanke på den höga frekvensen av falska svar i ELISA används analysen uteslutande för primär screening. För en noggrannare undersökning av den använda polymeras kedjereaktionen.

Pro-analys av PCR för hepatit C-virus

Hepatit C är en allvarlig leversjukdom för någon person. Patologin orsakas av flavivirus HCV, i vilken struktur RNA-molekylen är närvarande, vilken bär den allmänna genetiska koden för viruset.

Patologi kan vara av olika former, allt beror direkt på personens allmänna tillstånd och egenskaperna hos varje enskild organism.

Denna struktur gör det möjligt att analysera PCR för närvaron i kroppen av ett virus av kategorin hepatit C.

Det gör det möjligt för dig att identifiera ett virus som är farligt för människor i tid, genomgå en behandling av läkemedelsbehandling och återställa hälsan, skydda kroppen från förstörelsen av levern.

HCV-viruset kan manifestera sig, både i akut - farlig form och i kronisk. Om en person vid en eller annan gång har detekterats detta virus, måste det tilldelas PCR-analys.

Varför utförs PCR-analys?

Baserat på analysens resultat kommer läkaren att kunna upprätta en behandlingsregim.

Laboratoriemedicinsk analys av PCR för hepatit C är en studie av biologiskt material som tas för att bestämma flavavirus. Studien står för polymeraskedjereaktion.

Det visar det totala kvantitativa värdet av viral lesionen, dess kvalitativa egenskaper, och det är också möjligt att bestämma genotypen av viruset som innehåller RNA.

Det är viktigt! Det är på grundval av denna analys att läkaren bestämmer metoden, typen av terapi och dess varaktighet. Också genom analys är det möjligt att bestämma den övergripande epidemiologiska faktorn, det vill säga graden av risk för överföring av sjukdomen till andra bärare.

Analys i modern medicin kallas också RNA-analys. Anledningen är att inneboende för hepatit C-flavavirus är sammansatt av en partikel av RNA, vars storlek är ungefär 30-60 nm. En av de karakteristiska egenskaperna hos detta virus är en viss benägenhet för mutation.

Varje underart eller genotyp närvarande har en mängd resistans. Denna omständighet blir grunden för olika metoder för forskning och behandling av sjukdomen, liksom en ytterligare prognos med väl genomförd terapi.

Hur gör

Analysen utförs strikt på tom mage, det vill säga, venöst blod ges före frukost. Testmetoden utförs med realtids-PCR eller högkänslig med modern standarddiagnostik, som utförs i realtid.

Den lägre registreringsgränsen i detta fall är 15 IE / ml. Analysen utförs strikt med slutna automatiserade system. Hepatit C kan bestämmas med hjälp av tester som COBAS AMPLICOR med en övergripande känslighetsnivå på 50-100 IE / ml.

Det är viktigt! Alla typer av liknande modern laboratorieforskning utförs på grundval av att ta hänsyn till ett visst tröskelvärde.

Vi talar om förmågan hos reagenset som används för att detektera miniminivån av reagensens förmåga att bestämma viruset i det biologiska materialet som studeras. Om det inte finns någon sjukdom i kroppen kommer resultatet av studien att se ut som "inte hittat".

Bilden visar en PCR-analyskrets:

Typer av PCR-analys och dess resultat

Om du har de flesta mindre sjukdomarna och smärtan i kakorna, bör du omedelbart kontakta en läkare som kommer att göra en grundlig studie. PCR-analys för hepatit C är baserad på tre huvudpunkter:

1. Kvantitativ analys.
2. Kvalitativ analys.
3. Genotypning.

De utförda testerna ger möjlighet att bestämma och identifiera den exakta naturen av viremia och olika genetiska plan symptom på patogenens närvaro. I direkt proportion till känsligheten, från det diagnostiska systemet som utförs, kan medicinsk forskning utföras en gång, liksom viss bekräftelse.

Detta bör göras för att klargöra tidigare erhållna resultat och används i detta fall av ett känsligare reagens.

Högkvalitativ PCR

En kvalitativ analys för PCR är ett annat namn för en studie, såsom polymeraskedjereaktion. Med testets normala känslighet, som gör det möjligt att bestämma närvaron av en viralmikro, kommer indikatorerna att ligga i intervallet 10-500 IE / ml.

Med en negativ analys av sjukdomen kommer analysen att visa att den totala koncentrationsnivån i patientens blod kommer att vara en storleksordning lägre än den allmänna känslighetsgränsen för diagnosystemet.

Om ett "ej detekterat" svar erhölls under kvalitets-PCR, för efterföljande behandling, måste du veta reagensens totala känslighetsgräns. Vad gäller det positiva svaret, under PCR-analysen, kan det erhållas redan den 4: e dagen efter infektionen. Standardproteinfraktioner till etablerade flavavirus kan förekomma mycket senare.

Det allmänna schemat för PCR-analyser kan avbildas enligt följande:

Kvantitativ PCR

Kvantitativ PCR är en speciell indikator för den producerade virala belastningen, vilket återspeglar den totala nivån av virus-RNA-koncentrationen i människokroppen. Denna indikator visar mängden virala RNA-enzymer som är närvarande per kubikcentimeter från blodvenen.

Resultaten av denna studie i systemet för medicinsk forskning betecknas i enheter av en milliliter. På certifikat utfärdade i händerna kan denna indikator se ut som 1,7 miljoner eller 1.700.000 IE / ml.

Kvantitativ PCR-analys tilldelas de patienterna före antiviralbehandling. Andra gången hålls den 12: e behandlingen veckan, vilket gör det möjligt att korrekt utvärdera resultaten av behandlingen med hepatit C. Med andra ord gör analysen det möjligt att bestämma sådana viktiga parametrar som:

1. Nivån av smittsamhet, det vill säga graden av risk för mikrobiell överföring från en infekterad person till en frisk person bestäms. Ju högre koncentrationen av flavavirus RNA desto högre är sannolikheten för infektion hos en annan person, vilket är viktigt vid sexuella relationer.
2. Den totala effektiviteten och den valda behandlingsmetoden.
3. Detta är ett perfekt tillfälle att bestämma varaktigheten och prognosen för antiviral terapi. Som regel är ju högre belastningen desto längre kommer behandlingen att vara.

Det är värt att veta att kvantitativ PCR beror på den specifika typen laboratorietest och känslighetsgränsen. Den lägsta gränsen för den etablerade standarden är att indikatorn inte når 600 000 IE / ml.

Medelvärdet ligger inom intervallet 600 000 till 700 000 IE / ml. Om resultaten erhölls över 800 000 IE / ml bestämmer läkaren omedelbart en hög koncentration av ett ämne, såsom RNA, med ett virus som finns i kompositionen.

Det är viktigt! Det direkta sambandet mellan nivån av HCV RNA och svårighetsgraden av sjukdomen tyder på att detta virus är närvarande i den allmänna blodkompositionen och noterar också patologins komplexitet. Patienten kan ha en tillräckligt hög viral belastning. Dessutom indikerar detta förhållande att det finns en ganska allvarlig skada på cellerna.

genotypning

På grund av den relativt höga mutationsaktiviteten hos HCV i naturen är det möjligt att bestämma hur typen av virus är närvarande i blodet hos en sjuk person i samband med den utförda testningen. I modern medicin är 11 genotyper av ett virus som hepatit C kända. Det innehåller ett ganska stort antal olika underarter eller subtyper.

Typerna 1, 2 och 3 är kända och vanliga i Ryssland. Generellt är genotypning ett mycket viktigt element i den analys som utförs. Med det förstår läkaren nivån av resistens eller resistens hos patologin mot de valda läkemedlen.

Nästan alltid bygger på den här analysen framtida behandling. Detta är viktigt eftersom det finns behandlingsregler som:

Kvalitativ analys för hepatit C

8 mars 2017, 12:29 Expertartiklar: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

En kvalitativ analys av polymeraskedjereaktionen - PCR för hepatit C bestämmer närvaron eller frånvaron av HCV i kroppen. Vid laboratorieförhållanden undersöks strukturen hos RNA, vilket kommer att innefatta viruset. Vid detektering av viruset C är det nödvändigt att genomgå en behandlingsförlopp, eftersom leverans försummade tillstånd kommer att leda till allvarliga konsekvenser. PCR av hög kvalitet utförs efter återvinning för att bekräfta frånvaron av antikroppar. Utnämnd och för rutinbesiktning. Med låg koncentration av orsaksmedlet i blodet kan PCR (kvalitativ) inte upptäcka något, eftersom diagnostiksystemet har sina egna känslighetsgränser. Vid det första skedet av sjukdomen eller den milda formen utförs PCR genom ultradiagnostik på extremkänslig utrustning.

Vad är RNA-virus?

Termen RNA för hepatit C-viruset (eller hepatit C-virus-RNA) är själva leversjukdomen. Virus C binds till den friska cellen i kroppen genom att penetrera inuti. Med tiden sprids i hela kroppen är det bara nödvändigt att komma in i blodet. Som ett resultat tränger patogen in i levern, smälter med sina celler och arbetar hårt. Leverceller (hepatocyter) arbetar under sitt inflytande, genomgår förändringar, och från detta dör de. Ju längre viruset C är i levern, desto större dör antalet celler. Med tiden utvecklas farliga sjukdomar, vilket leder till illamående degeneration och död.

Infektion av levern med denna typ av virus kan inte manifestera sig externt. Under många år eller årtionden känner en smittad person sig helt frisk, och bara en slumpmässig undersökning avslöjar oftast patologi. Vid donation av blod till hepatit undersöks en del av RNA-kedjan (ribonukleinsyra) som är en del av den humana genen (DNA). Resultaten av laboratorietester ska inte användas för självbehandling, eftersom detta bara är en indikator. Den exakta bilden och ytterligare diagnos bestäms av läkaren bättre.

När det är klart: indikationer på forskning

I bekräftelse på HCV utförs PCR-analys (polymeraskedjereaktion). PCR-studier hjälper till att hitta orsaksmedlet i RNA-strukturen och förskriva en effektiv terapi. Utnämnd i följande fall:

• upptäckt av tecken på leverbetennande
• screeningstudier för förebyggande
• undersökning av personer i kontakt
• diagnos av hepatit av blandat ursprung (bestämning av huvudpatogen);
• bestämning av reproduktionsaktiviteten hos viruset i kronisk form;
• levercirros;
• för att bestämma effektiviteten av den föreskrivna behandlingen.

Forskning PCR föreskriver en läkare för att bestämma effektiviteten av behandlingstiden för hepatit.

Det finns en kvalitativ och kvantitativ analys av PCR. Kvantitativ PCR visar procentandelen av RNA med virusbärare i blodet, och kvalitativ indikerar viral närvaro eller frånvaro. En positiv indikator på kvalitet (närvaro av hepatit C RNA) behöver också kvantitativ forskning. En hög koncentration av orsaksmedlet för hepatit C är förenat med risken för överföring, det vill säga infektion hos andra. Lågtal är bättre behandlingsbara. Mängden RNA-virus i blodet är inte relaterat till intensiteten hos sjukdomen. PCR-analys görs även vid interferonbehandling för att förskriva behandlingscykelens varaktighet och komplexitet.

Funktioner av högkvalitativ PCR-analys för hepatit C

En kvalitativ analys med polymeraskedjereaktionsindexet tilldelas alla patienter som har antikroppar mot hepatit C som finns i deras blod. De som har varit sjuk och återställd måste ta provet igen. Det rekommenderas att passera testet för hepatit B, då vid en positiv slutsats och för hepatit D. Dessutom bör kvalitativt analyserad reaktion utföras i samband med andra blodprov. Analyser visar en komplett bild av viral spread.

Från testresultaten kommer endast ett positivt test för hepatit C att vara synligt eller negativt, det vill säga närvaron eller frånvaron av ett virus. Om utmatningen är "detekterad", är viruset och fortsätter att vara aktivt. Beteckningen "ej detekterad" indikerar avsaknaden av ett virus eller dess lilla mängd. Med denna indikator bör man komma ihåg att diagnostiksystemens analytiska känslighet är annorlunda och att RNA-hepatit C fortfarande kan vara i blodet, men inte manifesteras i analysen.

En särskilt känslig PCR-metod avslöjar ultra hepatit C även i svaga mängder. En fluorescenshybridiseringsstudie används, vilket är många gånger högre än standard PCR-system. Metoden används i flera fall:

• misstänkta dolda former av hepatit C;
• PCR-diagnostik bekräftade inte patogenen, men det finns antikroppar;
• vid återhämtning
• att upptäcka tidig infektion.

Tillbaka till innehållsförteckningen

Dekodningsanalys

PCR-avkodningen av HCV påverkar det slutgiltiga beslutet vid diagnos, i synnerhet med ultrametodsmetoden. Den största nackdelen med denna studie är strikt efterlevnad av sterila betingelser för provet och materialen. En liten avvikelse visar ibland otillräckliga analytiska slutsatser, komplicerar diagnos och efterföljande behandling. Analys av PCR för bestämning av hepatit RNA visar inte alltid konfidentiellt en bild av sjukdomen, ibland är felaktigheter tillåtna och i båda riktningarna.

Diagnostisera hepatitviruset, det rekommenderas att använda en omfattande undersökning.

Norm av indikatorer

Frånvaron av JgM antikroppar mot viral hepatit C i resultaten av studien anses vara normen i analysen av polymeraskedjereaktionen. Samtidigt visar resultaten av serologisk analys närvaron av antikroppar mot virus C och detta ligger också inom normalområdet. En kvalitativ definition visar inte intensiteten hos sjukdomen, det avslöjar bara orsaksmedlet för hepatit C i RNA. Denna analys upprepas efter behandling för att bekräfta den verkliga återhämtningen.

avvikelser

Om JgM antikroppar mot HCV RNA är närvarande, indikerar detta en utvecklingsinfektion. Sjukdomen pågår samtidigt akut eller kroniskt, manifesterad i olika steg. Om en minskning av antalet antikroppar registreras, kommer analysen att indikera att resultaten av behandlingen uppnåddes under återhämtning. Det finns extremt sällsynta fall av falska positiva fynd i diagnostiken. De finns hos kvinnor under graviditet och hos personer med andra infektionssjukdomar.

PCR-analys för hepatit C

För diagnosen "kronisk viral hepatit C (CVHS)" krävs en omfattande undersökning av personen, som inkluderar kliniska, laboratorie- och instrumentstudier. Viktigt ur diagnossynpunkt för den korrekta diagnosen är PCR-metoden - polymeras kedjereaktion.

Vad visar denna analys och varför behövs det?

Denna laboratoriemetod detekterar RNA hos hepatit C-viruset i humant blod. Tillsammans med den enzymbundna immunosorbentanalysen (ELISA) för antikroppar mot viruset används PCR för att diagnostisera CVHC och dess patogengenotyp. Denna forskning är en av de nyaste metoderna för laboratoriediagnostik. Tillförlitligheten vid CVHS överstiger 97%, vilket anses vara en mycket bra indikator för forskning.

Det finns tre PCR blodprov för CVHS: kvalitativ, kvantitativ och virusgenotyping. Den första studien (kvalitativ analys) av viruset detekterar det i blodet och används därför endast för diagnos.

Den andra (kvantitativa) studien bestämmer graden av viral belastning på kroppen, därför används för att övervaka effektiviteten av behandlingen.

Den tredje PCR (genotypning) klargör diagnosen, vilket fastställer genotypen av viruset, vilket är mycket viktigt för utnämningen av korrekt antiviral behandling.

Kärnan i polymeras kedjereaktionstekniken är användningen av enzymer som multiplicerar patogenens genetiska material i biomaterialet. Under processen för sådan replikation upphettas röret med blod flera gånger och kyles till den temperatur som krävs för att accelerera den enzymatiska reaktionen. Som ett resultat av dessa manipuleringar ökar mängden av virusgenomet många gånger, så att det kan detekteras även med en minimal mängd.

PCR-diagnostik har många fördelar jämfört med andra laboratorietester:

• hög känslighet - 97-98%;
• garanterad analytisk specificitet (avslöjar exakt den patogen som du vill hitta och inte dess relaterade stam);
• Hastighet av ledning (det tar inte mer än 2 dagar att få en slutsats).

Tre typer av PCR-analyser

Högkvalitativ PCR-analys tilldelas alla patienter i vilka ELISA-analysen upptäckte antikroppar mot HVGS-viruset. Efter utförande av högkvalitativ PCR kan två svaralternativ erhållas: "RNA detekteras" eller "RNA detekteras inte." För att detektera minsta mängd virus i blodet krävs testsystem med en känslighet av minst 50 IE / ml. Om koncentrationen av viruset i patientens blod är mindre än diagnostiken kan avgöra kan resultatet av studien vara falskt negativt. För att undvika ett sådant diagnostiskt fel ska laboratorier som utför PCR-diagnostik förses med mycket känsliga testsystem. I laboratoriet "Invitro" används exempelvis tester med en känslighet av 15 IE / ml. Laboratoriearbetare är skyldiga att lämna information om testens känslighet för patienter och läkare vid deras första förfrågan.

Kvantitativ analys av PCR bestämmer graden av viremi, det vill säga koncentrationen av patogenen i blodet, viral belastning. Resultatet av denna studie, i motsats till högkvalitativ PCR, uttrycks i antal, till exempel 2 × 10 * 6 IE / ml, vilket innebär 2 miljoner internationella enheter i 1 ml blod. Vissa laboratorier använder en annan indikator - antalet kopior / ml. Dessa två indikatorer är lätta att konvertera: 1 internationell enhet motsvarar 4 kopior av RNA. Således betyder 2 × 10 * 6 IE / ml att 8 × 10 * 6 kopior av viralt RNA i 1 ml, dvs. 8 miljoner exemplar i 1 ml blod.

Genotyping är definitionen av ett av sex genotyper av ett virus. Den kliniska bilden, utvecklingsgraden av leverkomplikationer och prognosen för patientens framtida liv beror på orsaksmedlets genotyp. Genotypen av viruset är mycket viktigt redan vid diagnossteget, eftersom kombinationen av läkemedel och varaktigheten av den terapeutiska kursen som ska tilldelas patienten beror på dess korrekta bestämning.

Men även denna till synes "perfekta" laboratorieforskning har dess nackdelar:

• Studien replikerar det genetiska materialet hos alla patogener, även icke-levande, vilket kan snedvrida resultatet. För att övervaka effektiviteten med hjälp av PCR utförs därför reanalys inte tidigare än 2 månader efter föregående, så att de döda virusen kan "lämna" patientens organism.
• En del av virusgenomet, som bestäms med hjälp av testsystem, kan teoretiskt vara närvarande i andra virus eller mikroorganismer, så det finns en möjlighet till falskt positivt svar.
• virus mutera snabbt. Ibland är hastigheten och omfattningen av virusmutation så hög att testsystemet slutar fånga sitt genom. Som ett resultat är ett falskt negativt resultat möjligt.

För att jämföra dessa brister utför tillverkare av laboratorietestsystem för PCR-diagnostik hela tiden sina test, inklusive korsreaktioner och känslighet för en viss genotyp av viruset.

Hur man tar ett PCR-test för hepatit C?

För att en PCR-undersökning ska kunna vara tillförlitlig är det nödvändigt att strikt följa förberedelsebestämmelserna för sitt beteende:

• Studien utförs på en tom mage (glukos, fetter, mineraler som kommer in i blodet från mat, kan påverka hastigheten och kvaliteten på enzymreaktionen).
• Mellanrummet mellan sista måltiden och blodprovtagning för analys bör vara minst 8 timmar;
• På dagen före studien är det förbjudet att ta alkohol och konsumera feta livsmedel, vars elimineringsperiod är långvarig.
• En dag innan man går till laboratoriet bör man undvika stark fysisk och känslomässig stress.
• tills blodprovstiden inte rekommenderas att röka.

För att undvika utseendet av falska slutsatser måste den påstådda patienten komma till laboratoriet lite tidigare än blodet kommer att tas. Det tar 15-20 minuter för en person att få andan, lugna sig ner. Adrenalin, som är närvarande i blodet efter en snabb promenad, kan påverka resultatet av undersökningen.

Om patienten som avses för analys tar några mediciner, ska han informera läkaren om detta. Det är möjligt att vissa av dem måste nekas under en tid (om möjligt).

Resultatet av analysen av PCR för hepatit C

Avkodning av resultaten involverade i laboratorieläkaren i laboratoriet som utförde analysen. Avkodning är bestämningen av avvikelsen för resultatet erhållet från normen. Indikatorhastigheten fastställs direkt av tillverkaren av testsystemet, som används av laboratoriet för diagnostik. Därför är det inte förvånande att i vissa laboratorier bestäms virusbelastningen i IE / ml och i andra i kopior / ml.

Efter att ha fått slutsatsen är det nödvändigt att kunna tolka det korrekt. Behandlingen av resultaten av studien ska utföras av patientens behandlande läkare med hepatit C. Endast efter en objektiv, instrumentell och laboratorieundersökning av patienten kan läkaren få en tillräcklig mängd data för korrekt tolkning av de erhållna PCR-resultaten.

Utvärdering av kvalitativ analys leder som regel inte till svårigheter, även hos patienter. Resultatet där kan bara vara ett: "detekterat" eller "ej detekterat". I det här fallet är den andra av dem normen.

Indikatorer för kvantitativ analys är svårare att tolka. Det visar graden av virusbelastning på patienten. Även bland hepatologer finns det ingen överenskommelse om hur man behandlar detekterade viremierna. De flesta läkare är benägna att tro att en hög belastning på mer än 8 × 10 * 5 IE / ml bör övervägas. En belastning på mer än 1 × 10 * 7 IE / ml anses vara mycket hög, medan en låg belastning är mindre än 4 × 10 * 5 IE / ml.

Graden av virusbelastning indikerar virulens (aggressivitet) av viruset: Ju större dess mängd i blodet desto snabbare komplikationerna i levern kan utvecklas. En hög koncentration av viruset i en gravid kvinnas blod ökar sannolikheten för dess penetration genom hemato-placental barriären till fostret. Viremia påverkar också effektiviteten av behandlingen: med lågt antal är effektiviteten av behandlingen högre än hos de höga.

För att vara säker på noggrannheten i analysen av PCR för hepatit C är det nödvändigt att föredra endast de laboratorier som är väl beprövade. Prissättningspolicy i detta fall borde inte spela en huvudroll.

Användning av PCR-diagnostik

Polymeraskedjereaktion (PCR) i molekylärbiologi är en experimentell metod för att detektera virus. Det gör att du kan öka koncentrationen av vissa nukleinsyrafragment (DNA) i prover av biologiskt material, vilket gör det möjligt att bestämma (igenkänna) och räkna dem.

Analysen utförs enligt följande. Genetiskt material (ett blodprov), som potentiellt kan inkludera den önskade genen, införs i röret. Det finns också placerade primrar - kemiskt syntetiserade segment av en liten längd av den önskade genen.

DNA eller RNA-polymeras läggs också till i kärlet, det kan ställa upp en nukleinsyrakedja som är helt identisk med originalet. Den resulterande kompositionen injiceras och en uppsättning av fyra fria nukleotider - ett speciellt byggmaterial för RNA eller DNA, varav en innehåller radioaktiva fosforpartiklar.

Den resulterande blandningen upphettas till 95-96 ° C, varför två DNA-helixer, som normalt är sammanflätade, är vävda. Därefter kyles läkemedlet, vid vilken tidpunkt primrarna själva bifogar den önskade regionen av virusgenomet, vilket förhindrar RNA (eller DNA) från att omforma dubbelhelixen.

Vid kylningsprocessen söker polymerasen efter en fri nukleotidkedja. För detta enzyms funktion behövs en enda kedja av nukleotider. Eftersom polymeras glider längs DNA-kedjan (som en ring på ett rep), kan den inte arbeta på en dubbelhelikix.

Efter detta utförs en upprepad uppvärmningscykel på grund av vilka nukleotidkedjor separeras. Vid var och en av dessa cykler av PCR ökar mängden i provet av den önskade genen av hepatit exponentiellt och resten av det genetiska materialet produceras (växer) linjärt.

Efter rening av lösningen från nukleotidrester och separation genom elektrofores av DNA-kedjor av molekylviktsparametern kan man lätt bestämma huruvida det finns en önskad gen i provet under studie eller ej.

Fördelar med PCR

Laboratorietestning med PCR möjliggör ännu mer information än närvaron av virus-RNA. Genom att bestämma parametern för nivån av radioaktiv strålning är det möjligt att identifiera hur mycket genetiskt material som ursprungligen fanns i provet som studerades. När det gäller hepatit, bestäm indikatorn för nivån av viral belastning.

En annan fördel med denna metod är den mycket höga känsligheten hos CR-reaktionen. Det är mycket högre än de klassiska metoderna för att upptäcka virus. För att identifiera den önskade genen för PCR är det lämpligt att endast ett virus i provet är tillräckligt.

Dessutom är PCR helt specifik. Dess primers är utformade på ett sådant sätt att de helt motsvarar de unika regionerna hos de önskade generna som ingen annan sekvens har. Liksom fingeravtryck är unika, har varje gen unika sekvenser av nukleotider.

Kvalitativ analys av PCR

Kvalitativ analys avslöjar endast närvaron av viruset i blodet. Detta test bör utföras för alla patienter i vilka antikroppar mot hepatit C hittades i blodet. Det kan resultera i endast ett av två värden: "detekterat" eller "ej detekterat". I en frisk person bör normen (referensvärdet) "inte detekteras".

Det finns en särskild tolkning av sådana resultat av den kvalitativa forskningen:

• Resultatet är "detekterat". Detta innebär att ett fragment av RNA som är specifikt för hepatit C-viruset hittades i det analyserade provet av biologiskt material som tagits. Därför är det faktum att patienten är infekterad med hepatit C-viruset. Om resultatet av högkvalitativt PCR är "detekterat" indikerar detta att viruset multiplicerar och vid den här tiden infekterar den nya leverceller i kroppen.
• Resultatet är "inte detekterat". En sådan bedömning indikerar att i det analyserade provet av det erhållna biologiska materialet i detta laboratorium inte fanns ett fragment av RNA som är specifikt för hepatit C-viruset. Alternativt var koncentrationen av RNA för patogeninfektionen i detta prov under testets känslighetsgräns.

I den akuta fasen av hepatit C-virus-RNA kan sådana kvalitativa studier med PCR-metoden detekteras redan efter 1-2 veckor omedelbart efter kroppsinfektion, det vill säga långt före utseendet av antikroppar mot hepatit i sig.

Otillförlitliga testresultat av denna studie kan erhållas genom att:

• förorenat biomaterial;
• närvaron av heparin i patientens blod;
• närvaron i provet av kemiska eller proteinämnen (hämmare) som påverkar de olika komponenterna i PCR.

För att utföra en kvalitativ analys av PCR krävs ingen speciell beredning av patienten för studien. Det material som används är venöst blod.

Utvärdering av resultat

Högkvalitativa PCR-test har en viss grad av känslighet, och beroende på forskningsens noggrannhet och utrustningsnivån i laboratoriet kan variera från 10 till 500 IE / ml.

Detta innebär att om viruset i blodprovet är närvarande i en mycket låg koncentration (mindre än tröskelvärdet för detta laboratories känslighet), kan resultatet för den sjuka patienten "inte detekteras". På grund av detta, när man utför en kvalitativ analys av PCR med låg nivå av viremi (låg viruskoncentration), till exempel för patienter som genomgår antiviral terapi, är det mycket viktigt att känna tröskelvärdet för detta diagnostiska system.

Varianter av diagnostiska system

För att kontrollera det virologiska svaret rekommenderas det att använda diagnostiska system med en känslighetsgräns på minst 50 IE / ml vid antiviral behandling. Dessa kriterier är uppfyllda, exempelvis med Cobas Ampicolor HCV-testanalysatorer (korrekt till 50 IE / ml), liksom RealBest HCV RNA (med en känslighet av 15 IE / ml).

Enligt WHO: s rekommendationer, för att fastställa en definitiv diagnos av hepatit C, är det nödvändigt att basera endast på grundval av trefaldig detektion av C-virus-RNA i patientens serumprover, i frånvaro av andra sorter av hepatitmarkörer.

Förutom PCR-metoder används också en TMA-analys (transkriptionsförstärkningsmetod) för att detektera HCV-RNA hos patienter. Den har den bästa känslighetsgränsen (5-10 IE / ml), men i vårt land är en sådan testmetod ännu inte så vanlig.

Sortimentet av upptäckta virusändringar

En sådan kvalitativ bestämning i serum av närvaron av hepatit C-virus-RNA gör det möjligt att bestämma flera genotyper av detta virus. För närvarande vet vetenskapen mer än sex genotyper av detta virus, liksom ca 10 subtyper av denna sjukdom.

I vårt land är vanliga virus 1, 2, 3 genotyper. Laboratorier kan upptäcka följande genotyper: 1a och 1b, 2a, 2b och 2c, samt 3, 4, 5a och 6, oavsett subtyper. För alla virusmodifieringar är detekteringsspecificiteten 100%.

PCR kvantitativ analys

Med hjälp av ett kvantitativt PCR-test bestäms koncentrationen av hepatitviruset i blodprover (viral belastning). Detta test för viremia (viruskoncentration) gör det möjligt att bestämma antalet enheter av ett visst genetiskt material (själva viruset RNA) som detekteras i en viss mängd. I detta fall bestämma dess koncentration i 1 ml, vilket motsvarar 1 cu. cm.

Kvantitativa analysparametrar uttrycks i siffror. I detta syfte används internationella enheter (IE) per milliliter (ml), benämnda IE / ml, som måttenheter. Nu, i vissa laboratorier kan mängden virus bestämmas i andra enheter: Antalet kopior per ml anges som kopior / ml.

• Datum. För hepatit C görs en sådan kvantitativ analys av PCR omedelbart före behandlingens början. Sedan den 1, 4, 12 och 24 veckorna. Utvärdering den 12: e veckan är vägledande, det gör det möjligt att bestämma effektiviteten av behandlingen.
• Förberedelse för analys. För att utföra en kvantitativ analys av PCR krävs inte speciell beredning av patienten för studien. En halvtimme före provtagningen ska inte röka. Venöst blod används som ett laboratoriematerial.

Utvärdering av resultat

För olika laboratorietestsystem finns olika omvandlingsfaktorer för denna indikator i IE / ml. I genomsnitt tar de omvandlingsparametern, där 4 kopior / ml = 1 IE / ml. Det är till exempel om laboratoriet ger resultatet av PCR-analysen 2,4 * 10 6 kopior / ml, då denna parameter ska delas in i 4 och vi får 6 * 10 5 IE / ml.

En belastning på 800 000 IE / ml anses vara hög, vilket ungefär motsvarar 3 000 000 exemplar / ml. Låg viremi, enligt vissa författare, motsvarar parametrarna för kvantitativ PCR under 400 000 IE / ml.

Som ett resultat av det kvantitativa testet kan de slutliga resultaten levereras inte i form av ett digitalt värde, men: "under mätområdet" eller "ej detekterat".

• Bedömning: "under mätområdet." Detta indikerar att det kvantitativa testet misslyckades med att detektera hepatit C-virus RNA, men viruset är själv närvarande i kroppen i mycket låga koncentrationer. Detta framgår av det ytterligare kvalitetsprovet, vilket bekräftar faktumet av virusets närvaro.
• Betyg: Detekterades inte. Detta resultat indikerar att det kvantitativa testet inte finns i prov RNA-viruset.

Parametern för virusbelastningen bestämmer först och främst graden av infektiöshet hos sjukdomen, nivån av "infektiöshet" hos patienten. Ju högre patientens viruskoncentration desto större är sannolikheten för att den vidarebefordras till andra människor. Till exempel, under samlag med en sjuk person, eller vertikalt. Denna kvantitativa indikator bidrar också till att bestämma effektiviteten av behandlingen av patienten.

Att genomföra en kvantitativ analys av CCP är viktigt för antiviral terapi, bedömning av framgång och planering av kursens varaktighet. Således, med ett snabbt svar från kroppen till behandling och en låg grad av viremi, kan behandlingens varaktighet minskas.

Om den kvantitativa PCR-parametern sakta reduceras, bör antiviral terapi förlängas eller modifieras. Om nivån på virusbelastningen är låg, är detta en gynnsam faktor vid terapin, om den är förhöjd, är den använda metoden ineffektiv och läkemedlen eller metoderna för deras användning bör ändras.

Kvalitativ och kvantitativ analys av PCR för hepatit C: negativ, positiv, transkript

Hepatit C är en viral leversjukdom orsakad av flavivirus HCV (från engelska hepatit C-virus), vars struktur innehåller en ribonukleinsyramolekyl (RNA). RNA bär virusets genetiska kod. Dess närvaro möjliggör analys av PCR för hepatit C.

Risken för HCV för en person ligger i det faktum att det så kallade serologiska fönstret (tiden mellan infektion och uppkomsten av en reaktion från immunsystemet) kan vara ganska lång - från flera veckor till sex månader.

Det upptäcker inte infektion och börjar behandling i tid.

Beroende på organismens individuella egenskaper kan bäraren av HCV manifestera sig i en akut form, såväl som en kronisk sjukdom som kräver lång och dyr behandling. Vid detektion av antikroppar mot HCV utförs en serie laboratorietester, inklusive PCR för hepatit C. Detta test görs för alla personer i vilka blodantikroppar mot HCV hittades.

Vad är PCR-analys?

Laboratorieanalys av PCR för hepatit C - En studie av biologiskt material för att identifiera förekomst av flavavirus.

Polymeraskedjereaktion (som förkortningen står för) visar det kvantitativa värdet av kroppens virala skada, dess kvalitativa egenskaper, liksom genotypen av viruset innehållande RNA.

På grundval av ytterligare analyser bestäms metoden och varaktigheten av behandlingen, liksom den epidemiologiska faktorn (graden av risk för överföring till en annan bärare).

Vad är Hepatit C RNA-analys?

Hepatit C-PCR kallas också RNA-analys (HCV RNA), eftersom Flavavirus innehåller en RNA-partikel med en virionsstorlek av 30-60 nm. En av egenskaperna hos denna mikroorganism är en hög benägenhet för mutationer.

Var och en av virusens underarter (genotyper) har ett annat motstånd, vilket medför olika behandlingsmetoder och arten av den ytterligare prognosen för patienten.

Biologiskt material (venöst blod) ges på en tom mage och är som regel testad av realtids PCR-metoden (högkänslig realtidsdiagnostik med en lägre detektionsgräns på 15 IE / ml med slutna automatiska system).

Det finns andra tester, till exempel COBAS AMPLICOR med en känslighet av 50-100 IE / ml. För varje laboratorietest är tröskeln för känslighet viktig, d.v.s. Reagens förmåga att detektera minimikoncentrationen av virus i biologiskt material.

Typer av analys för hepatit C genom PCR

Hepatit C PCR innehåller tre viktiga komponenter:

• kvalitativ analys;
• kvantitativ analys;
• genotypning.

Dessa tester kan avgöra viremias natur, liksom patogenens genetiska egenskaper. Beroende på diagnostiksystemets känslighet utförs studien en gång, och ibland görs ett andra test med ett känsligare reagens för att bekräfta eller förbättra resultaten.

Högkvalitativ PCR-hepatit C

Hepatit C PCR-analys kvalitativ är ett annat vanligt namn för analysen av polymeraskedjereaktionen. Testets normala känslighet, som medger att detekterar förekomsten av virala lesioner, ligger i intervallet 10-500 IE / ml.

En negativ PCR-analys för hepatit C visar att viruskoncentrationen i patientens blod ligger under tröskelvärdet för diagnostiksystemet.

Om högkvalitativ PCR gav svaret "inte detekterat", då för efterföljande behandling är det viktigt att ta reda på tröskeln för reagensens känslighet.

Proteinfraktioner till flavavirus framträder mycket senare.

Hepatit C Kvantitativ PCR

Hepatit C PCR-kvantitativ är en indikator på viral belastning, vilket återspeglar nivån av flavavirus-RNA-koncentrationen i kroppen. Detta är en indikator som visar hur många fragment av virus RNA finns per kubikcentimeter blod. Resultaten av PCR av hepatit C RNA i ett kvantitativt test i det konventionella systemet anges i internationella enheter per milliliter (IE / ml) och kan registreras på olika sätt, till exempel 1,7 miljoner eller 1,700,000 IE / ml.

Kvantitativ PCR-diagnostik av hepatit C är ordinerad till patienter före antiviralbehandling och vid vecka 12 i behandling för att utvärdera resultaten av den valda metoden för hantering av HCV. Viral belastning gör det möjligt att bestämma tre viktiga indikatorer på sjukdomen:

• infektivitet, d.v.s. graden av risk för virusöverföring från en bärare till en annan (ju högre koncentration av flavavirus-RNA desto högre är sannolikheten att infektera en annan person, exempelvis genom sexuell kontakt).
• metod och effektivitet av behandlingen
• Varaktigheten och prognosen för antiviral terapi (ju högre viral belastning desto längre behandling kvarstår).

Kvantitativ PCR-diagnostik av hepatit C beror på typ av laboratorietest och tröskeln för dess känslighet. Den nedre gränsen för normen anses vara indikatorn upp till 600.000 IE / ml, medelvärdet ligger inom 600.000-700.000 IE / ml. Resultat av 800.000 IE / ml och högre anses vara höga halter av RNA-innehållande virus.

genotypning

På grund av den höga mutationsaktiviteten hos HCV i naturen, vid testning, är det viktigt att identifiera vilken virusgenotyp som finns i patientens blod. Totalt har 11 genotyper av hepatit C-viruset spelats in på planeten, vilket inkluderar många underarter (undertyper). På Ryska federationens territorium fördelas 1,2 och 3.

Hepatit C PCR RNA tillsammans med genotyping är en mycket viktig del av analysen, eftersom tillåter läkaren att bestämma resistens (resistans) hos viruset, välj lämpliga läkemedel och föreskriva en behandlingsförlopp.

Genotypning tillåter också indirekt bestämning av leverns tillstånd. Till exempel åtföljs 3 genotypen av HCV ofta av steatos, där fett ackumuleras i organets celler.

Ett blodprov för PCR för hepatit C bör producera en siffra som bestämmer genotypen. Laboratoriesvar kan säga "inte skrivet" - och det betyder att ett virus är i humant blod som inte detekteras av testsystemet. Detta kan indikera att genotypen inte är typisk för ett visst geografiskt område. I det här fallet bör du upprepa analysen med en högre känslighet av diagnosystemet.

Avkodning av PCR-analys för hepatit C

Testet för hepatit C PCR kvantitativ dekryptering kan baseras på ovanstående data. När man erhåller resultaten från laboratorietester skrivs vanligtvis följande data:

• "Found" / "not found" (högkvalitativ PCR för hepatit C);
• antalet RNA-innehållande fraktioner, exempelvis 831.680 ME / ml (kvantitativ PCR-analys);
• figuren som bestämmer genotypen för HCV, till exempel - 1, 2, 3, 4;
• Testets namn är oftast realtid.

Det viktigaste i att dechiffrera PCR-analysen för hepatit C är det andra föremålet, vilket visar virusbelastningen, som bestämmer prognosen, metoden och varaktigheten av behandlingen.

Om PCR-testet för hepatit C är negativt och ELISA är positivt - vad betyder detta?

För att dechiffrera laboratorietester är det viktigt att kontakta en hepatolog eller en smittsam sjukdomsspecialist som kommer att förklara informationen som erhållits i enlighet med typ av diagnostik och dess känslighetsgräns. I medicinsk praxis finns det många data om blodprov som kan vilseleda en person utan medicinsk utbildning.

Till exempel, om testet för hepatit C PCR är negativt och ELISA är positivt, kan det innebära att det inte finns någon HCV i patientens blod för tillfället, men han har tidigare haft en akut form av hepatit C. Det finns antikroppar i blodet som har producerats efter invasionen av viruset tidigare. Men i modern medicinsk praxis anses ELISA-analys vara otillräcklig tillförlitlig och ger ofta otypiska resultat, så läkare använder det som primärt screening. Vid diagnos av en sjukdom styrs specialisterna exakt genom PCR-test.

Användbar video

Följande video berättar på ett mycket detaljerat och intressant sätt hur kärnan i PCR-metoden är, hur analysen utförs:

slutsats

För analys av PCR av hepatit C, tas normalt blod i blodet. Oftast finns det ett dubbelintag av biologiskt material - för ELISA, och direkt för PCR-test. För korrekta testresultat krävs att de grundläggande reglerna för laboratorieuppsamling av biologiskt material är uppfyllda:

• Blod för analys ges i den första halvan av dagen på tom mage;
• mellan måltid och bloduppsamling bör ta minst 8 timmar;
• Alkohol och stekt mat bör också uteslutas innan testet genomförs.
• under dagen före bloddonation är det nödvändigt att undvika hög fysisk ansträngning.

Blodtestresultat är vanligtvis redo nästa dag.