Tillgången till moderna anti-hepatit B (HBV) läkemedel med tydliga indikationer för administrationen kräver en noggrann och snabb kontroll av diagnosen. På grund av knappa kliniska data i de första veckorna av sjukdomen och begränsade immunanalysmetoder för analys minskar dock diagnosgraden.
Närvaron av markörer anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe gör det möjligt för dig att bekräfta HBV eller upptäcka en tidigare sjukdom. Men det är möjligt att bestämma förekomsten av aktiva virala partiklar i blodet och räkna deras antal vid tidpunkten för studien med PCR - ett kvantitativt realtidstest för att detektera hepatit B. Metoden jämförs med ELISA-diagnostikmetoderna, löser diagnosproblem och möjliggör att förutsäga sjukdomsförloppet medan man tar emot antivirala droger.
Grunderna för sjukdomsdiagnos
Diagnos av hepatit B är baserad på bedömningen av kliniska manifestationer, enzymimmunanalys och instrumentala metoder för forskning. Sjukdomen uppträder i den akuta fasen efter inkubationsperioden och, beroende på infektionsdosen och effektiviteten av behandlingen, går in i ett kroniskt stadium. Huvudsyftet med behandlingen är att förhindra kronisering, det vill säga eliminering av alla viruspartiklar från blodet. Den kliniska kursen av sjukdomen är ett botemedel utan efterföljande viremi.
Att eliminera infektionen måste bevisas med en kvantitativ metod för forskning.
Eftersom någon immunoassay med kvalitativ enzym gör det möjligt att indirekt diagnostisera HBV, så visar den inte patogenens närvaro i kroppens inre miljö, utan karaktäriserar immunsvaret mot infektionen, övervakar effektiviteten av behandlingen och det faktum att botemedel blir svåra att bevisa. Därför bör patienten med hepatit B eller med närvaro av diagnostiska kriterier i sin fördel genomföras polymeras-kedjereaktion för att kvantifiera antalet viruspartiklar i blodet. Diagnosfrekvensen är bristen på kopior av infektions DNA.
Beskrivning av diagnostikmetoden
Den högkänsliga metoden för PCR-diagnos av hepatit B hör till kategorin genetiskt konstruerade molekylära biologiska studier. Genom det bestäms av mängden viralt DNA i patientens biologiska material och tillåten hastighet. Enligt de erhållna resultaten fastställs antalet viruspartiklar per volymandel. Materialet för det diagnostiska testet är patientens venösa blod. Ett intag är önskvärt på en tom mage på grund av den möjliga effekten av chyleserum på resultatet av studien.
De erhållna resultaten måste ges till läkaren för tolkning och bestämning av ytterligare taktik. Oberoende avkodning representerar inte diagnostiskt värde.
Betydelsen av resultatet av antalet viruspartiklar erhållna genom PCR-metoden överstiger värdet av enzymimmunanalyser. Eftersom analysen i realtidsläge visar närvaron av orsakssambandet till sjukdomen i blodet, är dess informationsinnehåll högre än andra. Om ELISA endast indikerar förekomsten av antikroppar, som observeras från 4 veckor av inkubationsperioden och varar mer än 8 veckor efter viruseliminering från blodet, bekräftar polymeras kedjereaktionen klart sjukdomsaktiviteten eller dess botemedel, karakteriserar dynamiken hos den föreskrivna terapin.
Polymeraskedjereaktion med kvantitativ bestämning av patogenpartiklar löser diagnostiska frågor för att stoppa behandlingen på grund av återhämtning eller fortsatt behandling på grund av dess brist på effektivitet. Metoden är så specifik som möjligt för HBV-viruset och kännetecknas av ett acceptabelt fel.
Indikationer och prestationsmål
Kvantitativ analys av hepatit B är den mest tillförlitliga och låter dig bekräfta data som erhållits genom ELISA-metoder. Han utses när:
- uppnå ett positivt diagnostiskt resultat av ELISA;
- behandla en patient med en etablerad diagnos av viral leverskada
- i diagnosen hepatit blandad etiologi;
- Vid behov bestämma virusbelastningen hos en patient.
Eftersom enzymimmunanalysmetoden används i större utsträckning vid utövandet av en smittsam sjukdomsspecialist kan vissa patienter med mild sjukdom behandlas utan att behöva räkna viralbelastningen. Men PCR anses allmänt som "guldstandard" för diagnostik inom hepatologi, eftersom det på grund av det unika resultatet avlägsnas ett antal organisatoriska problem. Därför har patientens riktning för kvantitativ analys följande mål:
- erhålla data om antalet viruspartiklar i patientens blod;
- bekräftelse av den akuta kursen av hepatit och snabb kontroll av kronisk sjukdom;
- konstant detektering av latenta virusbärare med positiva ELISA-test, övervakning av deras viremier;
- besluta om utnämning av antiviral behandling, dess kombination och uppsägning.
Det viktigaste målet att tillämpa ett kvantitativt PCR-test för detektering av HBV är att identifiera möjliga kombinationer av behandling. I fall av hög viral belastning ger resultatet av analysen specialisten möjlighet att fortsätta med kombinationen av läkemedel. Under behandlingen är det lätt att bestämma effektiviteten av den föreskrivna farmakologiska behandlingen baserat på resultatet av PCR. Endast guidad av uppgifterna om immunanalysmetoder, det är omöjligt att i god tid fastställa behandlingssättet och dess nuvarande effektivitet. Därför är ett kvantitativt realtidstest en nödvändig analys innan behandling med akut hepatit, latent virusinfektion med hög viremi och kronisk HBV påbörjas.
Tolkning av kvantitativa PCR-testresultat
Tolkningen av resultaten av det kvantitativa PCR-testet bör utföras av patientens behandlande läkare. Det är nödvändigt att utvärdera den diagnostiska indikatorn och bestämma terapeutiska taktiken.
En standardanalysator kan producera en kvantitativ indikator som speglar antalet kopior av virus DNA som finns närvarande i det studerade venösa blodet. Måttenheter - kopior / ml, IE / ml (kopior per milliliter, internationella enheter per milliliter). Tolkningen av resultaten ges i tabellen med angivande av olika måttenheter.
Typer av PCR för hepatit B och tolkning av resultaten
Polymeraskedjereaktion är en typ av blodprov som korrekt kan detektera hepatit B-viruset. En egenskap hos metoden är att den kan visa HBV i sina tidiga steg - en månad efter infektion, medan ett specifikt antigen detekteras hos en patient först efter 2 månader. PCR kan detektera inte bara ett normalt DNA-virus utan även mutanta stammar som ingen annan analys kan se.
Vid avkodning av PCR för hepatit B jämförs resultaten med standardvärden. På grundval av detta fattas slutsatser om sjukdomens närvaro (positivt resultat), virusets koncentration (aktivitet) eller frånvaron av sjukdomen (negativt resultat). Databehandling är 2 veckor.
Typer av PCR för viral hepatit B
Det finns 2 typer av diagnostik som ordineras för hepatit B. Högkvalitativ PCR gör det möjligt att med 100% noggrannhet säga om HBV är i blodet eller ej. Kvantitativ PCR visar aktiviteten hos viruset, det vill säga hur mycket HBV-DNA finns i 1 ml blod.
PCR av hög kvalitet och dess tolkning
Ett blodprov för hepatit B genom PCR kan endast detektera närvaron av DNA-fragment. Utsedd i fallet då patienten misstänker HBV-infektion (HBV) eller när andra metoder för diagnos, till exempel, serologiska tester inte ger ett tydligt svar. Att avkoda resultaten vid genomförandet av en kvalitativ analys är mycket enkel:
- negativt resultat - ingen virus;
- positivt resultat - upptäckt virus.
Syftet med högkvalitativ PCR är att bekräfta eller förneka närvaron av hepatit B-viruset samt att utföra en tidig diagnos. Om HBV detekteras inom 1-2 veckor efter infektion, kommer behandlingen att vara så effektiv som möjligt. Med den aktiva utvecklingen av HBV i 2 månader och längre blir sjukdomen kronisk och kan inte fullständigt härdas.
I det fall där högkvalitativ PCR för hepatit indikeras av närvaron av ett virus är nästa steg att göra en kvantitativ diagnos.
Kvantitativ PCR
För att effektivt behandla eller utvärdera resultaten av behandlingen, är det inte tillräckligt att veta att patienten har HBV. Det är nödvändigt att kvantifiera värdet av DNA från hepatit B-virus i 1 ml blod, det vill säga virusbelastningen på kroppen. Denna typ av PCR för hepatit B utförs i följande fall:
- Innan du förskriver behandling.
- Att bedöma effektiviteten av behandlingen.
- Att bestämma utvecklingen av virusresistens mot de tagna läkemedlen.
- Att bestämma det stadium där sjukdomen är belägen.
Mätningsenheten för ett virus är internationella enheter (IE / ml) eller antalet DNA-kopior / ml, det vill säga antalet DNA-fragment per 1 ml blod. Förhållandet mellan de två enheterna beror på det valda testsystemet och varierar mellan 2 och 7 kopior / ml i 1 IE / ml. Om systemet är okänt används medelvärdet för omvandling:
1 IE / ml = 5 kopior / ml
Om kvantitativ analys görs omedelbart, är marginalhastigheten för diagnos av sjukdomen 75 IE / ml. När resultatet ligger ovanför denna indikator görs diagnosen HBV, nedan - HBV detekteras inte.
Behandling av kvantitativ PCR
I hepatit B är följande värden för virusbelastning (viremia), kopior / ml, PCR-standarderna:
- 10 ^ 5 kopior / ml. När det med en stor viral aktivitet finns en ökning av ALT-graden oftare 2 gånger på sex månader, antiviral terapi omedelbart ordineras.
För att ta reda på hur DNA-hepatit ska uppträda när det gäller kroniskhet, det vill säga övergången till kronisk form från akut, används även resultaten av PCR-diagnostik:
- HBV-DNA med 2 x 10 ^ 6 kopior / ml betyder att förvärvet av den kroniska formen av sjukdomen är oundviklig.
Förbereder sig för undersökningen
För att bestämma närvaron av HBV genom PCR tas blod från en ven. Förfarandet utförs alltid strikt på en tom mage och det är bäst att komma till laboratoriet på morgonen när den naturliga vilodagstiden är 8 timmar. För att resultaten av undersökningen ska vara korrekta är det nödvändigt att på förhand veta hur man förbereder sig för att gå till kliniken korrekt. Ytterligare steg är följande:
- Avslag från feta livsmedel, rökning, alkohol och sport i 12 timmar före förfarandet.
- Vila i 20 minuter omedelbart före donation av blod.
- Innan proceduren startas, ska sjuksköterskan varnas om de läkemedel som tas.
Varning! Om diagnosen utförs till ett barn under 5 år, då en halvtimme före proceduren, ska han dricka 1 glas kokt vatten var 10: e minut.
Sammanfattning
Hittills är PCR-diagnostik för detektering av hepatit B den mest exakta metoden. Metoden låter dig se de dolda och muterade formerna av sjukdomen, för att identifiera sjukdomen under de första veckorna efter infektion och följaktligen att genomföra en effektiv behandling. Beroende på situationen utförs kvalitativ eller kvantitativ PCR, som syftar till att detektera HBV och upprätta sin aktivitet. För att bli testad måste du kontakta en virolog, en specialist på smittsamma sjukdomar eller en hepatolog.
Hepatit B-DNA och PCR
DNA-test och PCR av hepatit B-viruset är de mest känsliga analyserna som upptäcker molekylära DNA-spår i levern som identifierar närvaron av ett virus. Kärnan i metoden består i multipel kopiering av ett DNA-fragment som hör till orsakets orsakssamband.
Hepatit B-typ PCR är en polymeras-kedjereaktion av ett externt kemiskt reagens med det biologiska materialet som undersöks, med syfte att identifiera virala DNA-molekyler i blodet och deras kvantitativa indikatorer per volymenhet. Analysen är tilldelad i följande fall:
- om du upplever tecken på hepatit B hos en patient
- under diagnostiska aktiviteter för blandad hepatit;
- för att klargöra effektiviteten av behandlingen.
För PCR-analys samlas venös blod. Innan studien borde du avstå från att äta ca 8 timmar.
Ett normalt resultat när detekteras DNA i ett virus anses vara "ej detekterat". Det betyder att viruset är frånvarande i blodet eller dess innehåll är obetydligt. Den slutliga diagnosen kan endast göras av en specialist på grundval av en omfattande biokemisk och immunologisk analys av blodplasma för typ B-hepatit. Läkaren föreskriver en behandlingsperiod. Självmedicinering innebär för stor risk.
Venös blodprovtagning görs för PCR-analys.
PCR-metoden gör det möjligt att upptäcka patogenens DNA även med minimal närvaro i det valda blodprovet. Dessutom tillåter analysen att detektera antigener som redan har utvecklats för viruset. Var och en av antigenerna indikerar ett specifikt stadium av sjukdomen:
- HBsAg - viruset är närvarande för tillfället.
- Anti-HBcor-patogen är för närvarande frånvarande, men det var tidigare.
- Anti-HBs - i blodet finns antikroppar mot hepatit B (som ett alternativ - herpes, HIV, klamydia, mykoplasmos, candidiasis, tuberkulos, tikburen encefalit och många andra sjukdomar).
Patologi och dess tecken
Hepatit B eller HBV är en virusinfektion som påverkar leverceller. Det är farligt inte bara genom direkta åtgärder på orgelens paranki, vilket försvagar barriärfunktionen och allmän immunitet. Allvarligare konsekvenser är möjliga, såsom levercirros och förekomst av maligna neoplasmer.
HBV sänds via blodet av en person som är infekterad med hepatit, hans utsöndring, genom kontakt med slemhinnor, särskilt vid samlag, hudskador, genom icke-sterila sprutor under blodtransfusion eller under abdominaloperationer. En nyfödd kan smittas av sin sjuka mamma när hon rör sprickorna i hennes bröstvårtor.
Följande symtom är karakteristiska för hepatit B:
Ovanlig trötthet
- ökar trötthet vid låga belastningar;
- ovanlig trötthet
- tyngd i rätt hypokondrium;
- minskad aptit, illamående
- yellowness av huden, ögonsklera
- ljusa avföring
- mörk urin;
- smärta i lederna.
Inkubationsperioden, varefter dessa symptom börjar dyka upp, är från en till sex månader. Detta är perioden för ackumulering av virusceller i blodet i levern. När deras koncentration når en kritisk massa, bryter viruset genom membranerna av hepatocyter och fortsätter att föröka sig inuti cellerna. Som ett resultat av detta, lever leverceller, utvecklar cirros, vilket i avsaknad av lämpliga terapeutiska åtgärder leder till att patienten blir dödlig. Ett tidigt blodprov för PCR och hepatit B-DNA hjälper till att undvika negativa.
Indikationer för PCR är:
- positivt DNA-test som bekräftar diagnosen av hepatit B;
- akut och kronisk hepatit;
- blandad hepatit;
- kvantitativ bestämning av viruset i blodserum;
- utveckling av taktik för effektiv terapi.
Förberedelse för analys
Förberedelser för diagnos med användning av PCR bestäms av typen av biomaterial. Så blod och urin donerar bara på morgonen, på en tom mage. Också tagit smuts och skrap från urogenitalområdet. Den enda begränsningen för kvinnor är menstruation. Kön är begränsad för båda könen före forskningsdagen.
Resultaten av PCR kan endast betraktas som pålitliga om patienten är korrekt förberedd för förfarandet. Denna studie innebär följande villkor:
- full av andlig komfort, frånvaron av spänning. För att säkerställa denna analys kan passeras ens hemma. Det är bara nödvändigt att ringa en läkare med lämplig utrustning.
- avstå från mat, alkohol, rökning, fysisk aktivitet minst 8-12 timmar före analysen, annars kommer forskningsdata att förvrängas.
- 15-20 minuter av fullständig avkoppling före bloduppsamling
- avbrytande av läkemedel (om detta inte är möjligt bör varningen vara varnad)
- Barn under fem år i en halvtimme innan analysen ska ges kokt vatten att dricka i små portioner.
Hur är studien
PCR-analysen är baserad på de principer som används av molekylärbiologi. De består i användningen av speciella enzymer som klyver och replikerar delar av DNA och RNA från det infektiösa medlet som finns i blodet. Efter denna operation identifieras de erhållna proverna av databasen tillgänglig i laboratoriet. Samtidigt detekteras typen av infektion och koncentration i patogenens blod.
För studien används en förstärkare - en termostat som kan värma och kyla rör med biomaterial. Detta är nödvändigt för aktivering av replikationsprocesser. Noggrannheten i analysen beror på noggrannheten hos temperaturparametrarna.
Avkodningsresultat
Ett positivt resultat för patienten är laboratorieuppsättningen "inte detekterad". Det betyder frånvaro av hepatit B-DNA i blod. I numeriska termer är detta cirka 120 IE / ml, eller 200 kopior per samma enhet av blodvolymen. Detta värde är normen. Kravet på biologiskt material är att det inte bör vara förorenat.
Avkodning av andra analysresultat gör det möjligt att göra följande diagnoser:
- Hepatit B DNA-koncentration i blodet är mer än 200 kopior, men under kritisk nivå. Allvarlig patologi är frånvarande.
- Viremia i mild form, upp till 500 kopior per ml. Valet av behandling beror på indikatorerna för leverbiopsi och graden av försämring av dess funktioner.
- Ökad viruskoncentration (mer än 500 kopior / ml). Den inflammatoriska processen i den aktiva fasen och kräver intensiv antiviral terapi.
- Maximal virusbelastning (över 800 exemplar per ml). Terapeutiska åtgärder utvecklas utifrån patientens tillstånd och syftar helt till maximal förbättring.
Att bestämma de kvantitativa indikatorerna för DNA-innehållet i hepatit B under PCR är grunden för valet av terapeutisk kurs. Efter tre eller sex månader utförs test igen för att testa effektiviteten av antiviral terapi.
Polymeraskedjereaktionsegenskap
I metoden för PCR används två metoder för bestämning av DNA som hör till viruset: kvalitativ och kvantitativ.
Ett kvalitativt tillvägagångssätt bekräftar eller förnekar närvaron av hepatit B. PCR föreskrivs på begäran av en patient som misstänker att han är infekterad med HBV-infektion eller i fallet då tidig diagnos inte ger otvetydiga resultat på något annat sätt.
Om hepatit B-viruset kan detekteras senast två veckor efter inträdet i kroppen, är en positiv prognos för behandling troligast. I framtiden kommer sjukdomen att börja utvecklas. Efter ca två månader kommer hon att gå in i en kronisk fas. En fullständig botemedel i detta fall blir omöjlig.
Ett kvantitativt tillvägagångssätt för PCR används endast när ett virus detekteras. Han utvärderar:
- specifik viral belastning på levern
- intensiteten av sjukdomsprogressionen
- resistens mot antivirala läkemedel;
- effektivitet av behandlingen.
Dessa indikatorer har direkt praktisk betydelse. Speciellt kvantitativ indikator på DNA. Prognosen i den akuta fasen av hepatit B beror på virusets koncentration i leverns blodomlopp. Således utesluter en låg koncentration av virusceller nästan helt övergången från akut till kronisk hepatit. Sådana patienter utgör ingen fara för andra. Hög viral belastning bidrar till kronologin av den patologiska processen och möjligheten till hepatitinfektion hos personer som är i kontakt med patienten.
Det finns också en koppling mellan koncentrationen av virusgener i blodet och cirrhotisk degenerering av levern och förekomsten av cancer av dess parenchyma.
PCR-test hjälper läkaren att upptäcka virusbärare.
Effektiviteten av antiviral terapi bestäms av graden av minskning av koncentrationen av hepatit B-DNA i levercirkulationen. Ett tillräckligt resultat är minskningen av viral belastning med 1-2 gånger med intensiv behandling i tre månader till sex månader. Lägre satser kräver förändrad behandling.
Prognosen för utveckling av patologi och utnämning av lämplig terapi kommer från:
- kvantitativ volym hepativirusvirus-DNA i blodserum;
- relaterade biokemiska parametrar (till exempel nivån av leukocyter i blodet och bilirubinhalten där);
- virusinfektion markörer;
- leverbiopsi-resultat.
PCR med allmänt ändamål
Analyser med hjälp av polymeraskedjereaktion hjälper läkaren:
- detektera bärare av viruset
- förutsäga utvecklingen av hepatit typ B;
- se till att sjukdomen blir kronisk;
- övervaka virusets aktivitet i alla utvecklingsfaser
- identifiera mutanta och dolda stammar av hepatit B;
- utvärdera effektiviteten av behandlingen av viruset när man väljer en viss taktik och byter den om den inte uppnår tillräcklig framgång.
Fördelarna med metoden
Till skillnad från andra tester som används för att diagnostisera hepatit B har PCR:
PCR-analys är extremt känslig.
- Exceptionell känslighet. Tekniken gör det möjligt för forskaren att upptäcka orsakssambandet hos sjukdomen, även om koncentrationen av DNA-molekylerna i blodet är minimal. Detta gör att du kan vidta förebyggande och botande åtgärder vid ett tidigt skede av sjukdomen, när det uppenbarligen inte är uttryckt av några symtom.
- Bred täckning av möjligheter. PCR kan detektera inte bara orsaksmedlet för viral hepatit B, men också ett antal andra patologier.
- Universitet av tillvägagångssätt. Biomaterialet för forskning kan vara blod, saliv, slemhinnor och hud.
- Effektivitet. Slutsatsen kommer att vara klar exakt en dag efter blodprovtagning (resultatet av själva analysen erhålls senast 7 timmar).
- Tillförlitlighet. Under alla förhållanden i PCR-metoden visas aldrig falska data.
- Pris tillgänglighet studie. Till kostnad är PCR endast något högre än de vanliga testerna som använder blod som biomaterial.
Den enda kostnaden för forskning är dess tekniska komplexitet. För högkvalitativt genomförande av PCR krävs ett extremt rent biomaterial, modern utrustning och välutbildad personal. Det är att föredra att söka diagnostik med hjälp av denna metod till specialiserade laboratorier.
Viral hepatit B avser sjukdomar, vars fullständiga botemedel endast är möjliga vid de tidigaste utvecklingsstadierna. Identifiera sjukdomen i denna fas hjälper överkänslig diagnos med PCR. De första symptomen som orsakar misstanke om leverskador med ett virus bör vara en anledning att konsultera en specialist. Om diagnosen bekräftas ska behandlingen påbörjas omedelbart. Detta kommer att förbättra prognosen och öka sannolikheten att stödja levern i ett hälsosamt tillstånd i många år.
Dekryptera blodprov för hepatit B
Hepatit B är en av de farligaste sjukdomarna i vår tid.
Det orsakas av ett virus som kommer in i kroppen när blodet kommer i kontakt med infekterat biologiskt material, inklusive de som finns kvar på manikyrtillbehör, medicinska instrument, tatueringsmaskiner som inte har desinficerats på rätt sätt. Viruset kan också överföras genom sexuell kontakt.
Hepatit B analyseras för att diagnostisera sjukdomen genom att ta patientens blod.
Infektion sker genom sexuella och inhemska vägar, spridningstypen är hematogen (genom blod). När infekterat kommer viruset in i hepatocyterna (leverceller), som produceras i framtiden. Genom blodbanan sprider sig sjukdomen snabbt genom kroppen. Viruset B (HBV) kännetecknas av hög resistans mot effekterna av temperatur och syra och kan bibehålla sina skadliga egenskaper i sex månader.
Vilka blodprov har du för hepatit B?
Om hepatit B visade de första symtomen är det nödvändigt att godkänna test före behandling och behandling. Ett blodprov är en pålitlig metod för att installera hepatitinfektion. Genomförs i laboratoriet. Testmaterialet Hepatit B ges på tom mage: minst 8 timmar ska gå från den sista måltiden.
För att detektera hepatit B-viruset i blodet används test av tre typer som karakteriserar närvaron av viruset i blodet:
- analys för närvaron av HBV-DNA i materialet genom att studera polymeraskedjereaktionen;
- kvalitativ studie av närvaron av anti-HBc-IgG-proteinet och HBsAg-antigenet (finns i hälsosam, infekterad och sjuk);
- analys för detektering av proteiner HBeAg och anti-HBc IgM (karakteriserar försämringen av sjukdomen).
För fullständighet rekommenderas det att samtidigt utföra forskning på flera markörer.
Immunologiska tester för hepatit B
De vanligaste testerna för hepatit B är immunologiska. Deras väsen är att upptäcka antikroppar i blodet som produceras av kroppen eller levern. Proverna är kvalitativa och kvantitativa. Hepatit B-test och transkript innehåller vanligtvis information om flera karakteristiska proteiner. Under provet testas följande antikroppar:
Det förekommer i de tidiga stadierna av infektion innan kliniska tecken påbörjas.
En positiv markör indikerar närvaron av ett virus, men finns också i helt friska människor. Om mindre än 0,05 IE / ml är närvarande i blodet anses resultatet negativt. Om koncentrationen av antikroppen är högre anses analysen vara positiv.
Det finns i nästan alla smittade patienter. Att hålla indikatorer på hög nivå kan indikera en övergång av sjukdomen till en kronisk form av kursen. En positiv markör indikerar närvaron av sjukdomen under perioden av exacerbation, långvarig återhämtning. HBeAg är ett extremt dåligt tecken. Patienten är mycket smittsam. Normalt detekteras inte proteinet i blodet.
Det finns två typer av anti-HBc-antikroppar: IgG och IgM. Närvaron av IgM i blodflödet är en indikation på den akuta formen, hög smittsamhet hos patienten och möjligheten pererohoda sjukdomar kroniska. Normalt är närvaron av IgM inte tillåtet. IgG är en gynnsam indikator. Markören indikerar kroppsformad immunitet mot hepatit B.
Om en markör detekteras i blodet kan man dra slutsatsen om sjukdomens gynnsamma förlopp och bildandet av skyddande immunitet i patienten.
- Anti-HBs.
Markören signalerar återhämtning och bildandet av immunitet.
HBV-DNA-detektion med PCR
För laboratorieundersökning och detektering av förekomsten av en diagnos av hepatit B i blodet används PCR-metoden. Det sätt på vilket polymeraskedjereaktionen anses vara den mest aktuella inom området för upptäckt av sjukdomar.
Den slutliga avkodningen visar om det finns spår av genen närvaron av patogenen i levercellerna.
Om alla principer följs under forskningen är resultatet absolut noggrant. Metoden används för diagnos, används i behandlingsprocessen och i antiviral terapi.
- En högkvalitativ PCR på totalen har endast två betydelser: "detekterade" och "ej detekterade". Förfarandet utförs för varje patient med misstänkt hepatit. Med en genomsnittlig känslighet för PCR-testet i intervallet från 10 till 500 IE / ml, med låga nivåer av virus-DNA i blodet, kommer ingen genmaterial att detekteras.
- Kvantitativ PCR. I motsats till det kvalitativa indikerar det inte bara hepatit B. Kvantitativ analys indikerar hur långt normen hos en frisk person ligger långt ifrån patientens indikatorer i numeriska termer. Metoden gör det möjligt att bedöma sjukdomsfasen och förskriva behandling. Känsligheten hos PCR-testet i kvantitativt följd är högre än i den kvalitativa metoden. Basen är räkningen av det detekterade DNA som uttrycks i kopior per milliliter eller IE / ml.
Dessutom ger kvantitativ PCR inblick i effekterna av behandlingen och korrektheten hos den valda terapin. Beroende på mängden virusgenmaterial kan ett beslut fattas för att förkorta behandlingens varaktighet eller omvänt att utvidga och stärka det.
Biokemiskt blodprov för hepatit B
Metoden för biokemisk analys krävs för att få en fullständig klinisk bild av sjukdomsförloppet. Denna diagnostiska metod ger en förståelse för de inre organens arbete (lever, njure, gallblåsa, sköldkörtel och andra). Dekodning ger en förståelse för ämnesomsättningen i kroppen, de möjliga metabolismen av patologi. Detaljerade indikatorer visar på brist på vitaminer, makronäringsämnen och mineraler som är nödvändiga för människors hälsa och liv.
Du kan ta ett test för hepatit hos något annat diagnostiskt center (Invitro, Gemotest, etc.). Biokemiskt blodprov för detektering av hepatit B innefattar följande komponenter.
Kvantitativ analys av enzymet ALT (AlAt)
Detta enzym finns oftast i förhöjda koncentrationer vid akut och kronisk hepatit. Ämnet finns i levercellerna och med organskador genom blodbanan går in i blodkärlen.
Mängden och koncentrationen i blodet under en virussjukdom förändras ständigt, så forskning genomförs minst en gång i kvartalet. ALT återspeglar inte bara aktiviteten hos hepatitviruset, men också graden av försämring som orsakas av det i levern. Nivån på ALT ökar med ökande mängder giftiga ämnen av hepatiskt ursprung och i närvaro av viruset.
Kvantitativ analys av AST-enzym
Protein är en del av människans viktigaste organ: lever, nervvävnad, njurevävnad, skelett och muskler. Enzymet är inblandat i att bygga den viktigaste muskeln - hjärtat. Hög AST hos en patient med hepatit B kan signalera leverfibros. En liknande situation uppstår när alkohol, droger eller annan giftig skada på levercellerna.
Överhettningsindikatorer är ett tecken på leverskador på mobilnivån. Vid diagnos är det nödvändigt att ta hänsyn till förhållandet mellan AST och ALT (de Rytis-koefficienten). En samtidig ökning av koncentrationen av båda enzymerna är ett tecken på levernekros.
bilirubin
Ämnet bildas i mjälten och leveren som ett resultat av nedbrytningen av hemoglobin i deras vävnader. Denna komponent är en del av gallan. Det finns två proteinfraktioner: Direkt bilirubin (bunden) och indirekt bilirubin (fri). Med en ökning av blodbunden bilirubin är det vettigt att misstänka hepatit eller annan leverskada. Detta är direkt relaterat till cytolysen av leverceller.
Om mängden indirekt bilirubin ökar, är det troligtvis en skada av parenkymvävnad eller Gilberts syndrom. Den höga nivån av bilirubin enligt resultaten av analysen kan vara en följd av obstruktion av gallkanalerna. När bilirubin nivåer över 30 mikromol per liter hos patienten verkar fördomsfull skiftning på huden blir urin mörkt och ögonvitor ändra färg.
albumin
Syntes av detta protein förekommer i levern. Om dess mängd minskas, indikerar detta en minskning av syntesen av enzymer i kroppen på grund av förekomsten av svåra lesioner i levercellerna.
Totalt protein
Om mängden totalt protein blir signifikant lägre än den accepterade normen, indikerar detta en avmattning i leverens funktion.
GGT (GGTP)
Ett enzym som används vid detektering av obstruktiv gulsot och cholecystit. En ökning av GGT-nivån är en signal om giftig leverskade. Kan provoceras av kronisk alkoholism och okontrollerad användning av droger. Protein är särskilt känsligt för toxiner och alkohol, under deras inflytande växer sin aktivitet snabbt. Att upprätthålla en hög koncentration av GGT i blodet under en lång tid talar om svår leverskada.
kreatinin
Det är en produkt av proteinmetabolism som uppträder i levern. En kraftig nedgång i nivån är en signal som orgeln saktar ner
Proteinfraktioner
En minskning av nivån av proteinfraktioner är ett tecken på leversjukdom.
Dekodningsanalys för hepatit B och värden är normala
Diagnostiserande hepatit B är en kumulativ studie av indikatorer. Endast deras omfattande analys gör det möjligt att dra slutsatser om patientens infektion. Tänk på avkodningsanalysen för hepatit B. För jämförelse, halten av ämnen i blodet.
PCR-analys för hepatit B
DNA-viruset från familjen Hepadnaviridae är det direkta orsaksmedlet för hepatit B. PCR-analys av hepatit B tillåter närvaron av ett infekterat DNA-virus att detekteras i patientens blod. Resultatet av en positiv typ på HBV-DNA visar närvaron av infektion i patientens blod. Det bör noteras att diagnosen genom användning av PCR-analys gör det möjligt att inte bara bestämma förekomst av infektion, men också dess kvantitativa belastning och aktivitet. Denna metod är pålitlig, korrekt och reproducerbar. Kvantifiering av HBV-DNA med qPCR kan användas för att övervaka effektiviteten av HBV-terapi och vara användbar för att förstå HBV: s naturhistoria i en endemisk area.
Infektionsprocessen med hepatit B uppstår genom inhemsk eller sexuell kontakt - genom direktkontakt med infekterat blod. Efter infektion kommer viruset i levercellerna, där det fortsätter sin aktiva reproduktion. Genom blodbanan sprider patogena celler genom kroppen. Det är värt att notera att hepatit B-celler är mycket resistenta mot syra och hög temperatur. Han kan bibehålla sina skadliga egenskaper i sex månader.
Typer av PCR för hepatit B
Hittills finns det två typer av diagnostik som föreskrivs om du misstänker förekomsten av hepatit B-virus: kvalitativ PCR (medger att du kan bestämma virusets närvaro i blodet med 100% noggrannhet) och kvantitativ PCR (gör det möjligt att bestämma graden av virusaktivitet).
PCR av hög kvalitet föreskrivs om det finns misstanke om HBV-infektion eller om andra diagnostiska metoder inte har givit några klara resultat. Denna typ av PCR-analys är extremt lätt att dechiffrera: negativ (inget virus detekterat i blodet), positivt (virus detekterat i blodet). Den huvudsakliga uppgiften med kvalitativ analys är att bestämma närvaron av infekterade celler i sjukdoms tidiga skeden. Om viruset diagnostiserades två veckor efter den påstådda infektionen, blir behandlingen effektivare mycket högre. Om viruset i blodet är ungefär två månader blir sjukdomen kronisk, därför kan den inte helt botas.
Om en kvalitativ diagnos bekräftar närvaron av HBV i blodet, föreskriver läkaren en kvantitativ analys.
Kvantitativ analys gör det möjligt att bestämma aktiviteten av virusutvecklingen i patientens kropp. Denna typ av PCR-analys tilldelas:
- att bestämma sjukdomsfasen
- att övervaka effektiviteten hos den applicerade terapin;
- att bestämma nivån på resistans hos viruset till ett visst läkemedel;
- för val av droger.
Kvantitativa indikatorer på viruset i blodet mäts i IE per milliliter eller DNA per milliliter.
Om läkaren föreskriver en kvantitativ diagnos omedelbart, utan att kontrollera den kvalitativa, anses 75 IE per milliliter vara normen. Om färre internationella enheter detekteras, är resultatet att HBV inte detekteras när siffrorna är över normala, förekomsten av viral hepatit B diagnostiseras.
Tolkning av kvantitativ diagnos
Följande indikatorer (i kopior / milliliter) anses vara norm för CRP i hepatit B: mindre än 10 3 - inaktivt virus; från 10 4 till 10 5 - viruset är vanligtvis inaktivt; 10 6 - aktivt virus; 10 7 - ett virus i ett högt aktivitetsstadium.
Baserat på kvantitativa indikatorer kan man med 100% noggrannhet bestämma sjukdomsformen (bärare, akut eller kronisk), reaktionen av viruset till behandling, behovet av ytterligare diagnostik.
Den kroniska formen av hepatit B fastställs om virusets aktivitet är 10 5 kopior per milliliter. En bärare diagnostiseras om poängen är under 10 5 kopior per milliliter.
Under behandlingsperioden är det nödvändigt att regelbundet (en gång var tredje månad) upprepa kvantitativ diagnostik för att i tid beakta perioden då viruset utvecklar immunitet mot de använda drogerna och ändrar metoden. Om alla studier har utförts korrekt och en effektiv behandling har valts kommer en upprepad analys (efter tre dagers behandling) att visa en minskning av aktiviteten hos patogena celler med minst 85%.
En leverbiopsi utförs endast i det fall då sex månaders behandling har visat att ALT-nivåerna är dubbelt så höga som vanliga och PCR-diagnostik visar frekvenser lägre än 10 5 kopior per milliliter blod.
Förbereder sig för undersökningen
Venös blod krävs för analys. För att få de mest exakta resultaten är det nödvändigt att förbereda för proceduren: vägra att ta mat minst åtta timmar före blodinsamlingen; i två dagar att vägra behandling med läkemedel (det är absolut nödvändigt att varna läkaren om att ta drogerna) du måste tillbringa tjugo minuter i viloläge innan du donerar blod; Tolv timmar före förfarandet, ge upp sportövningar, alkoholhaltiga drycker, röka och äta feta livsmedel.
Det är viktigt: om diagnosen är nödvändig för ett barn under fem månaders ålder, måste han ge ett glas kokt vatten var tionde minut sextio minuter före blodinsamlingsproceduren.
Sammanfattning
PCR-analys för hepatit B idag är den mest exakta metoden för att diagnostisera ett virus. Metoden gör det möjligt att bestämma de muterade och dolda formerna av sjukdomen, för att diagnostisera sjukdomen under de första infektionsdagarna, för att välja den mest effektiva behandlingen. Laboratorieassistenten jämför analysens resultat med normen, och tar sedan med sig slutsatsen. Uppgifterna behandlas inom två veckor. För att få en hänvisning till PCR-analys är det nödvändigt att kontakta en hepatolog, en smittsam specialist eller en virolog. Det är viktigt att komma ihåg att ju snabbare du kommer till doktorn, ju snabbare resultaten kommer att bli, desto effektivare blir behandlingen.
Kärnan i analysen av PCR för hepatit B och dess resultat
Viral hepatit B behandlas framgångsrikt om den detekteras i tid och antalet antikroppar och antigener i patientens blod bestäms korrekt. Med hjälp av en enzymimmunanalys för hepatit är det möjligt att upptäcka närvaron av virusmarkörer, men de kan inte bestämma det exakta stadiet av processen.
För kvantitativ utvärdering användes PCR-diagnostik. Med testet är det möjligt att räkna antalet markörer, förutse sjukdomsförloppet och sannolikheten för botemedel med hjälp av antivirala läkemedel.
Den största fördelen med studien är förmågan att upptäcka även minimala koncentrationer av viruset, för att identifiera patogenen vid artsteget.
Diagnos av hepatit B
Hepatit B-virus är mycket smittsamt och motståndskraftigt mot yttre påverkan. Den förblir aktiv i blodet hos en patient i flera veckor. Därför är varje person utsatt för infektion, även om profylax observeras.
För att diagnostisera sjukdomen förskriva följande studier:
Kärnan i PCR-metoden
Amerikanska kemisten K.Mullis fick Nobelpriset, och hans diagnostiska metod används fortfarande.
Förfader till PCR-metoden (polymeraskedjereaktion) anses vara en forskare från Norge H. Kleppe. Han började först utföra DNA-förstärkningen (återhämtning) genom att använda en kort DNA-kedja, det vill säga en syntetisk primer (ett slags kopia).
Men forskaren misslyckades med att förverkliga sin idé. Liknande studier gjordes av den amerikanska kemisten K.Mullis, som år 1993 tilldelades Nobelpriset för sin uppfinning. Sedan dess har PCR använts för att upprätta faderskap, diagnostisera genetiska sjukdomar och upptäcka virus.
Kärnan i reaktionen är att med hjälp av enzymer kopieras en viss bit DNA. Du kan bara kopiera området som motsvarar de angivna parametrarna och om det finns i det presenterade provet. Följande komponenter används för att starta reaktionen:
- Matris DNA med en webbplats som ska kopieras.
- Primers liknar struktur i DNA.
- Polymeras, det vill säga enzymet som utlöser reaktionen. Det ska vara termostabil, det vill säga att motstå extremiteter i temperaturen.
- Lösning med vissa parametrar, vilket säkerställer reaktionens genomgång.
Reaktionen utförs i flera steg:
För detektion av hepatit B används två typer av reaktioner: kvantitativa och kvalitativa.
Kvantitativ PCR
Den kvantitativa metoden bestämmer mängden av HBV genomet
Kvantitativ PCR innefattar samtidig skapande av kopior av DNA-fragment och bestämning av antalet molekyler. Mätningen utförs efter varje steg, det vill säga i realtid. Detta uppnås genom att använda fluorescerande sonder, vilka ingår i en kedja av molekyler och glöd under en viss period av studien.
Denna metod används för att detektera DNA-fragment som är markörer av hepatitviruset. Med hjälp av den kvantitativa metoden är det möjligt att exakt isolera genotypen av viruset. Med andra ord beräknas antalet kopior av HBV-genomet per patientcellnummer.
Kvantitativ analys ger svar på följande frågor:
- Med vilken intensitet utvecklar sjukdomen.
- Hur effektiv är behandlingen.
- Har läkemedelsresistens utvecklats?
Dessutom är kvantitativ mätning nödvändig för diagnos av det kroniska infektionsstadiet. Om mängden DNA ligger under 100 st / ml vid normal transaminasnivå, är personen en bärare av viruset.
I den akuta fasen är mängden antikroppar mycket högre. I antiviral terapi indikerar en ökning av antalet antikroppar utvecklingen av läkemedelsresistens, detta är en signal för att justera behandlingen.
Högkvalitativ PCR
Högkvalitativ PCR ger mindre information, men kan eliminera infektion.
PCR av hög kvalitet kan endast fastställa förekomsten av patogen i blodet. Om de är frånvarande är patienten inte infekterad, om patogen kommer in i blodet, blir resultatet positivt.
Men med hjälp av kvalitativ reaktion är det omöjligt att klargöra genomet av viruset, sjukdomsstadiet. Därför utförde diagnosen HBV både kvantitativ och kvalitativ mätning.
Förbereder sig för undersökningen
Venös blod krävs för PCR-analysen. Detta måste ske på morgonen på en tom mage.
Patienten ska korrekt förbereda sig för studien:
- I 10 timmar att vägra mat kan du bara dricka rent vatten.
- På kvällen för att sluta ta alkohol, i 4 timmar att inte röka.
- Innan undersökningen bör undvikas fysisk och känslomässig stress.
- Sluta använda medicinen i 2 dagar, om det inte är möjligt, är det nödvändigt att meddela laboratorie tekniker. Vissa läkemedel påverkar slutresultatet.
Tolkning av data
I en kvantitativ reaktion utvärderas de erhållna indikatorerna beroende på antalet DNA-kopior.
Det är lätt att tolka kvalitetsmätningsdata. Han ger antingen ett positivt eller negativt svar.
I en kvantitativ reaktion är det möjligt att utvärdera de erhållna indikatorerna beroende på antalet DNA-kopior. Måttenhet är kopior / ml.
Data avkodas enligt följande:
- Om mängden HBV-DNA är mindre än 90, är infektionen frånvarande. Patienten utvecklade immunitet efter immunisering, eller han var botad av sjukdomen.
- När antalet kopior 2x100 pratar om virusets bärare.
- Antalet 2x106 indikerar ett kroniskt stadium av sjukdomen.
- Med DNA mer än 2x109 har patienten ett akut stadium av hepatit.
Felaktiga resultat
Fördelarna med den diagnostiska metoden med användning av polymerasreaktioner är som följer:
- Direkt detektering av patogener. I motsats härtill tillhandahåller ELISA information om närvaron av antikroppar mot viruset.
- Specificitet. Det vill säga det är DNA-regionen som är närvarande i biomaterialprovet som kopieras.
- Överkänslighet. Metoden kan även detektera enskilda cellfragment.
- Diagnos av sjukdomar i akuta och latenta skeden. Det är, det är möjligt att diagnostisera sjukdomen vid scenen av prekliniska manifestationer.
Metoden har brister som leder till falska resultat. Den viktigaste nackdelen är sannolikheten för kontaminering av materialet. Den främsta källan till förorening är dåligt bearbetade rör, laboratoriehänder, reagenser.
En del av DNA från en tidigare reaktion kan komma in i blodet. Därför påläggs laboratorierna ökade hygienkrav: separata rum, plaströr, ultraviolett behandling av laboratorier etc.
Falska negativa resultat kan bero på minskad känslighet av reaktionen. Detta händer i följande situationer:
- patienten tar mediciner, till exempel antikoagulantia;
- personen drabbades av fysisk stress före analysen (spelar sport, hårt arbete);
- infektion har inträffat nyligen.
Om patienten har en hög sannolikhet för infektion, och resultatet av studien är negativt, behöver han ses över.
Se även:
slutsats
Polymeraskedjereaktionsmetoden är den viktigaste och mest informativa för diagnosen av HBV. Det gör det inte bara möjligt att fastställa infektionens bärarstatus, men också för att klargöra sjukdomsfasen, för att utvärdera resultaten av behandlingen.
För en mer noggrann diagnos används en kvalitativ och kvantitativ mätning. Nackdelarna med metoden innefattar sannolikheten för kontaminering, reducerad känslighet och ett ganska högt pris.
För att resultaten ska vara mest tillförlitliga bör man ordentligt förbereda sig för studien och genomföra den i kliniken med lämplig licens och gott rykte.
Studier av hepatit B-viruset (ELISA och PCR)
Hepatit B-virus "s" -antigen (HBsAg)
Hepatit B-ytantigen i serum är normalt frånvarande.
Detektion av hepatit B-ytantigen (HBsAg) i serum bekräftar akut eller kronisk infektion med hepatit B-viruset.
Vid akut sjukdom detekteras HBsAg i serum under de senaste 1-2 veckorna av inkubationsperioden och de första 2-3 veckorna i klinisk period. Cirkulation av HBsAg i blodet kan vara begränsad till några dagar, så du bör sträva efter en tidig initial undersökning av patienter. ELISA-metoden tillåter att detektera HBsAg hos mer än 90% av patienterna. Nästan 5% av patienterna upptäcker inte de mest känsliga forskningsmetoderna HBsAg, i sådana fall bekräftas etiologin hos viral hepatit B genom närvaron av anti-HBcAg JgM eller PCR.
Serum HBsAg-koncentrationen i alla former av hepatit B-svårighetsgrad vid sjukdomshöjden har ett signifikant spektrum av fluktuationer, men det finns ett visst mönster: under den akuta perioden föreligger ett omvänt förhållande mellan serum HBsAg-koncentration och svårighetsgrad av sjukdomen.
Höga halter av HBsAg är vanligare vid milda och måttliga former av sjukdomen. I svåra och maligna former är koncentrationen av HBsAg i blodet ofta låg, och i 20% av patienterna med svår form och i 30% med ett malignt antigen i blodet kan det inte påvisas alls. Utseendet på denna bakgrund hos patienter med antikroppar mot HBsAg betraktas som ett ogynnsamt diagnostiskt tecken; Det är bestämt i maligna former av hepatit B.
I den akuta kursen av hepatit B minskar koncentrationen av HBsAg i blodet gradvis tills fullständigt försvinnande av detta antigen. HBsAg försvinner hos de flesta patienter inom 3 månader från början av en akut infektion.
En minskning av HBsAg-koncentrationen med mer än 50% vid slutet av den tredje veckan av den akuta perioden indikerar som regel att infektionsprocessen är nära avslutad. Vanligtvis hos patienter med hög koncentration av HBsAg vid sjukdomshöjden detekteras det i blodet i flera månader.
För patienter med låga koncentrationer av HBsAg försvinner mycket tidigare (ibland flera dagar efter sjukdomsuppkomsten). I allmänhet varierar tiden för HBsAg-detektering från flera dagar till 4-5 månader. Den maximala detektionsperioden för HBsAg med en jämn kurs av akut hepatit B överstiger inte 6 månader från sjukdomsuppkomsten.
HBsAg kan hittas hos friska personer som regel i profylaktiska eller oavsiktliga studier. I sådana fall undersöks andra markörer av viral hepatit B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg, och leverfunktionen studeras.
Vid negativa resultat är upprepade studier på HBsAg nödvändiga.
Om upprepade blodprov i mer än 3 månader avslöjar HBsAg klassificeras denna patient som en kronisk patient med viral hepatit B.
Förekomsten av HBsAg är ganska vanlig. Det finns över 300 miljoner bärare i världen, och i vårt land finns det cirka 10 miljoner transportörer.
Uppsägning av HBsAg-cirkulation med efterföljande serokonversion (bildning av anti-HBs) indikerar alltid återhämtning - sanering av kroppen.
Ett blodprov för närvaron av HBsAg används för följande ändamål:
- inkubationsperiod;
- akut sjukdom
- tidig återhämtning
- långvarig kronisk hepatit;
- levercirros;
för screening och identifiering av patienter i riskgrupper:
Utvärdering av forskningsresultat
Resultaten av studien uttrycks kvalitativt - positiva eller negativa. Ett negativt resultat indikerar frånvaron av serum HBsAg. Ett positivt resultat - identifieringen av HBsAg indikerar en inkubation eller akut period av akut viral hepatit B, såväl som i kronisk viral hepatit B.
Antikroppar mot kärnantigen av hepatit B-virus JgG (anti-HBcAg JgG)
Normalt är serum anti-HBcAg frånvarande i serum.
Hos patienter med anti-HBcAg förekommer JgG under den akuta perioden av viral hepatit B och kvarstår under hela livet. Anti-HBcAg JgG är den ledande markören för överförd HBV.
Blodtest för anti-HBcAg JgG används för att diagnostisera:
Utvärdering av forskningsresultat
Resultatet av studien uttrycks kvalitativt - positivt eller negativt. Ett negativt resultat indikerar frånvaron av serum anti-HBcAg JgG. Ett positivt resultat - identifieringen av anti-HBcAg JgG indikerar akut infektion, konvalescens eller tidigare överförd viral hepatit B.
Hepatit B-virus "e" -antigen (HBeAg)
Normalt är HBeAg i serum frånvarande.
HBeAg kan hittas i serum hos de flesta patienter med akut viral hepatit B. Det försvinner vanligtvis i blodet före HBs-antigenet. En hög nivå av HBeAg under de första veckorna av sjukdomen eller dess detektion i mer än 8 veckor ger anledning att misstänka en kronisk infektion.
Detta antigen detekteras ofta i kronisk aktiv hepatit av viral etiologi. Av särskilt intresse för definitionen av HBeAg är det faktum att dess detektion karaktäriserar den aktiva replikativa fasen av den infektiösa processen. Det har fastställts att höga koncentrationer av HBeAg motsvarar hög DNA-polymerasaktivitet och karakteriserar aktiv replikation av viruset.
Närvaron av HBeAg i blodet indikerar dess höga infektionsförmåga, d.v.s. Närvaron av aktiv hepatit B-infektion i kroppen undersöks och detekteras endast i närvaro av HBs-antigen i blodet. Hos patienter med kronisk aktiv hepatit används antivirala läkemedel endast när HBeAg detekteras i blodet. HBeAg - antigen - en markör för den akuta fasen och replikation av hepatit B-viruset.
Ett blodprov för närvaron av HBe-antigen används för att diagnostisera:
Utvärdering av forskningsresultat
Resultatet av studien uttrycks kvalitativt - positivt eller negativt. Ett negativt resultat indikerar frånvaron av serum HBeAg. Ett positivt resultat - detektering av HBeAg indikerar en inkubation eller akut period av akut viral hepatit B eller den fortsatta replikationen av viruset och patientens infektiösitet.
Antikroppar mot antigenet "e" av hepatit B-viruset (anti-HBeAg)
Anti-HBeAg i serum är normalt frånvarande. Utseendet av anti-HBeAg-antikroppar indikerar vanligtvis intensivt avlägsnande från kroppen av hepatit B-viruset och mindre infektion hos patienten.
Dessa antikroppar uppträder under den akuta perioden och kvarstår upp till 5 år efter infektionen. Vid kronisk persistent hepatit finns anti-HBeAg i patientens blod tillsammans med HBsAg. Serokonversion, d.v.s. Övergången av HBeAg till anti-HBeAg, med kronisk aktiv hepatit, oftare prognostiskt gynnsam, men samma serokonversion förbättrar inte prognosen för svår cirrhotisk levertransformation.
Blodprov för förekomst av anti-HBeAg används i följande fall vid diagnos av viral hepatit B:
Utvärdering av forskningsresultat
Resultatet av studien uttrycks kvalitativt - positivt eller negativt. Ett negativt resultat indikerar frånvaron av antikroppar mot HBeAg i serum. Ett positivt resultat är detektering av antikroppar mot HBeAg, vilket kan indikera initialt stadium av akut viral hepatit B, den akuta infektionsperioden, det tidiga stadiet av konvalescens, konvalescens, nyligen överförd viral hepatit B eller persistent viral hepatit B.
Kriterierna för förekomst av kronisk hepatit B är:
Detektion av hepatit B-virus genom PCR (kvalitativt)
Hepatit B-virus i blodet är normalt frånvarande.
Den kvalitativa bestämningen av hepatit B-viruset genom PCR-metoden i blodet gör det möjligt att bekräfta närvaron av viruset i patientens kropp och därmed fastställa etiologin hos sjukdomen.
Denna studie ger användbar information för diagnos av akut viral hepatit B i inkubation och tidiga utvecklingsstadier av sjukdomen, då patientens huvudsakliga serologiska markörer i blodet kan vara frånvarande. Serumviralt DNA detekteras hos 50% av patienterna i frånvaro av HBeAg. Analyskänsligheten hos PCR-metoden är inte mindre än 80 virala partiklar i 5 pl, det sista DNA-detekteringsprovet, specificitet - 98%.
Denna metod är viktig för diagnostisering och övervakning av kronisk HBV. Cirka 5-10% av cirros och andra kroniska leversjukdomar orsakas av kronisk bärare av hepatit B-virus. Markörer av aktiviteten hos sådana sjukdomar är närvaron av HBeAg och DNA av hepatit B-virus i blodet.
PCR-metoden gör det möjligt att bestämma i blodet DNA av hepatit B-viruset både kvalitativt och kvantitativt. Det bestämda fragmentet i båda fallen är den unika DNA-sekvensen av genen för det strukturella proteinet hos hepatit B-viruset.
Detektion av hepatit B-virus DNA i biomaterial som använder PCR är nödvändigt för:
Försvinnandet av hepatit B-DNA från blod är ett tecken på effektiviteten av behandlingen
Detektion av hepatit B-virus genom PCR (kvantitativ)
Denna metod ger viktig information om intensiteten i sjukdomsutvecklingen, effektiviteten av behandlingen och utvecklingen av resistens mot aktiva droger.
För diagnos av viral hepatit genom PCR i serum används testsystem, vars känslighet är 50-100 exemplar i ett prov, vilket gör det möjligt att detektera viruset i en koncentration av 5 X 10 ^ 3 -10 ^ 4 kopior / ml. PCR i viral hepatit B är absolut nödvändigt för att bedöma viral replikation.
Serumviralt DNA detekteras hos 50% av patienterna i frånvaro av HBeAg. Blodserum, lymfocyter och hepatobiopsi kan fungera som material för att detektera DNA från hepatit B-virus.
- Bedömning av nivån på viremi är följande:
- mindre än 2,10 ^ 5 kopior / ml (mindre än 2,10 ^ 5 IE / ml) - låg viremi;
- från 2,10 ^ 5 kopior / ml (2,10 ^ 5 IE / ml) till 2,10 ^ 6 kopior / ml (8,10 ^ 5 IE / ml) - medium viremi;
- mer än 2,10 ^ 6 kopior / ml - hög viremi.
Det finns ett samband mellan resultatet av akut viral hepatit B och koncentrationen av HBV-DNA i patientens blod. Med en låg nivå av viremi är processen för förkortning av infektionen nära noll, med i genomsnitt är behandlingen chroniserad hos 25-30% av patienterna och med en hög nivå av viremi blir akut viral hepatit B oftast kronisk.
Indikationerna för behandling av kronisk HBV-interferon-alfa bör betraktas som närvaron av markörer med aktiv viral replikation (detektion av HBV HBV, HBeAg och HBV-DNA i blodserumet under de senaste 6 månaderna.).
Kriterierna för att utvärdera effektiviteten av behandlingen är försvinnandet av HBEAg och HBV-DNA i blodet, vilket vanligtvis åtföljs av normalisering av transaminasnivåer och långvarig remission av sjukdomen. HBV-DNA försvinner från blodet vid den 5: e behandlingsmånaden hos 80% av patienterna. Att minska nivån av viremia med 85% eller mer senast den tredje dagen från behandlingstiden jämfört med baslinjen är ett snabbt och ganska noggrant kriterium för att förutsäga effektiviteten av behandlingen.