Mängden kvantitativ analys för hepatit B

Tillgången till moderna anti-hepatit B (HBV) läkemedel med tydliga indikationer för administrationen kräver en noggrann och snabb kontroll av diagnosen. På grund av knappa kliniska data i de första veckorna av sjukdomen och begränsade immunanalysmetoder för analys minskar dock diagnosgraden.

Närvaron av markörer anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe gör det möjligt för dig att bekräfta HBV eller upptäcka en tidigare sjukdom. Men det är möjligt att bestämma förekomsten av aktiva virala partiklar i blodet och räkna deras antal vid tidpunkten för studien med PCR - ett kvantitativt realtidstest för att detektera hepatit B. Metoden jämförs med ELISA-diagnostikmetoderna, löser diagnosproblem och möjliggör att förutsäga sjukdomsförloppet medan man tar emot antivirala droger.

Grunderna för sjukdomsdiagnos

Diagnos av hepatit B är baserad på bedömningen av kliniska manifestationer, enzymimmunanalys och instrumentala metoder för forskning. Sjukdomen uppträder i den akuta fasen efter inkubationsperioden och, beroende på infektionsdosen och effektiviteten av behandlingen, går in i ett kroniskt stadium. Huvudsyftet med behandlingen är att förhindra kronisering, det vill säga eliminering av alla viruspartiklar från blodet. Den kliniska kursen av sjukdomen är ett botemedel utan efterföljande viremi.

Att eliminera infektionen måste bevisas med en kvantitativ metod för forskning.

Eftersom någon immunoassay med kvalitativ enzym gör det möjligt att indirekt diagnostisera HBV, så visar den inte patogenens närvaro i kroppens inre miljö, utan karaktäriserar immunsvaret mot infektionen, övervakar effektiviteten av behandlingen och det faktum att botemedel blir svåra att bevisa. Därför bör patienten med hepatit B eller med närvaro av diagnostiska kriterier i sin fördel genomföras polymeras-kedjereaktion för att kvantifiera antalet viruspartiklar i blodet. Diagnosfrekvensen är bristen på kopior av infektions DNA.

Beskrivning av diagnostikmetoden

Den högkänsliga metoden för PCR-diagnos av hepatit B hör till kategorin genetiskt konstruerade molekylära biologiska studier. Genom det bestäms av mängden viralt DNA i patientens biologiska material och tillåten hastighet. Enligt de erhållna resultaten fastställs antalet viruspartiklar per volymandel. Materialet för det diagnostiska testet är patientens venösa blod. Ett intag är önskvärt på en tom mage på grund av den möjliga effekten av chyleserum på resultatet av studien.

De erhållna resultaten måste ges till läkaren för tolkning och bestämning av ytterligare taktik. Oberoende avkodning representerar inte diagnostiskt värde.

Betydelsen av resultatet av antalet viruspartiklar erhållna genom PCR-metoden överstiger värdet av enzymimmunanalyser. Eftersom analysen i realtidsläge visar närvaron av orsakssambandet till sjukdomen i blodet, är dess informationsinnehåll högre än andra. Om ELISA endast indikerar förekomsten av antikroppar, som observeras från 4 veckor av inkubationsperioden och varar mer än 8 veckor efter viruseliminering från blodet, bekräftar polymeras kedjereaktionen klart sjukdomsaktiviteten eller dess botemedel, karakteriserar dynamiken hos den föreskrivna terapin.

Polymeraskedjereaktion med kvantitativ bestämning av patogenpartiklar löser diagnostiska frågor för att stoppa behandlingen på grund av återhämtning eller fortsatt behandling på grund av dess brist på effektivitet. Metoden är så specifik som möjligt för HBV-viruset och kännetecknas av ett acceptabelt fel.

Indikationer och prestationsmål

Kvantitativ analys av hepatit B är den mest tillförlitliga och låter dig bekräfta data som erhållits genom ELISA-metoder. Han utses när:

1. uppnå ett positivt diagnostiskt resultat av ELISA;
2. behandla en patient med en etablerad diagnos av viral leverskada
3. i diagnosen hepatit blandad etiologi;
4. Vid behov bestämma virusbelastningen hos en patient.

Eftersom enzymimmunanalysmetoden används i större utsträckning vid utövandet av en smittsam sjukdomsspecialist kan vissa patienter med mild sjukdom behandlas utan att behöva räkna viralbelastningen. Men PCR anses allmänt som "guldstandard" för diagnostik inom hepatologi, eftersom det på grund av det unika resultatet avlägsnas ett antal organisatoriska problem. Därför har patientens riktning för kvantitativ analys följande mål:

• erhålla data om antalet viruspartiklar i patientens blod;
• bekräftelse av den akuta kursen av hepatit och snabb kontroll av kronisk sjukdom;
• konstant detektering av latenta virusbärare med positiva ELISA-test, övervakning av deras viremier;
• besluta om utnämning av antiviral behandling, dess kombination och uppsägning.

Det viktigaste målet att tillämpa ett kvantitativt PCR-test för detektering av HBV är att identifiera möjliga kombinationer av behandling. I fall av hög viral belastning ger resultatet av analysen specialisten möjlighet att fortsätta med kombinationen av läkemedel. Under behandlingen är det lätt att bestämma effektiviteten av den föreskrivna farmakologiska behandlingen baserat på resultatet av PCR. Endast guidad av uppgifterna om immunanalysmetoder, det är omöjligt att i god tid fastställa behandlingssättet och dess nuvarande effektivitet. Därför är ett kvantitativt realtidstest en nödvändig analys innan behandling med akut hepatit, latent virusinfektion med hög viremi och kronisk HBV påbörjas.

Tolkning av kvantitativa PCR-testresultat

Tolkningen av resultaten av det kvantitativa PCR-testet bör utföras av patientens behandlande läkare. Det är nödvändigt att utvärdera den diagnostiska indikatorn och bestämma terapeutiska taktiken.

En standardanalysator kan producera en kvantitativ indikator som speglar antalet kopior av virus DNA som finns närvarande i det studerade venösa blodet. Måttenheter - kopior / ml, IE / ml (kopior per milliliter, internationella enheter per milliliter). Tolkningen av resultaten ges i tabellen med angivande av olika måttenheter.

Dekryptera blodprov för hepatit B

Hepatit B är en av de farligaste sjukdomarna i vår tid.

Det orsakas av ett virus som kommer in i kroppen när blodet kommer i kontakt med infekterat biologiskt material, inklusive de som finns kvar på manikyrtillbehör, medicinska instrument, tatueringsmaskiner som inte har desinficerats på rätt sätt. Viruset kan också överföras genom sexuell kontakt.

Hepatit B analyseras för att diagnostisera sjukdomen genom att ta patientens blod.

Infektion sker genom sexuella och inhemska vägar, spridningstypen är hematogen (genom blod). När infekterat kommer viruset in i hepatocyterna (leverceller), som produceras i framtiden. Genom blodbanan sprider sig sjukdomen snabbt genom kroppen. Viruset B (HBV) kännetecknas av hög resistans mot effekterna av temperatur och syra och kan bibehålla sina skadliga egenskaper i sex månader.

Vilka blodprov har du för hepatit B?

Om hepatit B visade de första symtomen är det nödvändigt att godkänna test före behandling och behandling. Ett blodprov är en pålitlig metod för att installera hepatitinfektion. Genomförs i laboratoriet. Testmaterialet Hepatit B ges på tom mage: minst 8 timmar ska gå från den sista måltiden.

För att detektera hepatit B-viruset i blodet används test av tre typer som karakteriserar närvaron av viruset i blodet:

• analys för närvaron av HBV-DNA i materialet genom att studera polymeraskedjereaktionen;
• kvalitativ studie av närvaron av anti-HBc-IgG-proteinet och HBsAg-antigenet (finns i hälsosam, infekterad och sjuk);

• analys för detektering av proteiner HBeAg och anti-HBc IgM (karakteriserar försämringen av sjukdomen).

För fullständighet rekommenderas det att samtidigt utföra forskning på flera markörer.

Immunologiska tester för hepatit B

De vanligaste testerna för hepatit B är immunologiska. Deras väsen är att upptäcka antikroppar i blodet som produceras av kroppen eller levern. Proverna är kvalitativa och kvantitativa. Hepatit B-test och transkript innehåller vanligtvis information om flera karakteristiska proteiner. Under provet testas följande antikroppar:

Det förekommer i de tidiga stadierna av infektion innan kliniska tecken påbörjas.

En positiv markör indikerar närvaron av ett virus, men finns också i helt friska människor. Om mindre än 0,05 IE / ml är närvarande i blodet anses resultatet negativt. Om koncentrationen av antikroppen är högre anses analysen vara positiv.

Det finns i nästan alla smittade patienter. Att hålla indikatorer på hög nivå kan indikera en övergång av sjukdomen till en kronisk form av kursen. En positiv markör indikerar närvaron av sjukdomen under perioden av exacerbation, långvarig återhämtning. HBeAg är ett extremt dåligt tecken. Patienten är mycket smittsam. Normalt detekteras inte proteinet i blodet.

Det finns två typer av anti-HBc-antikroppar: IgG och IgM. Närvaron av IgM i blodflödet är en indikation på den akuta formen, hög smittsamhet hos patienten och möjligheten pererohoda sjukdomar kroniska. Normalt är närvaron av IgM inte tillåtet. IgG är en gynnsam indikator. Markören indikerar kroppsformad immunitet mot hepatit B.

Om en markör detekteras i blodet kan man dra slutsatsen om sjukdomens gynnsamma förlopp och bildandet av skyddande immunitet i patienten.

• Anti-HBs.

Markören signalerar återhämtning och bildandet av immunitet.

HBV-DNA-detektion med PCR

För laboratorieundersökning och detektering av förekomsten av en diagnos av hepatit B i blodet används PCR-metoden. Det sätt på vilket polymeraskedjereaktionen anses vara den mest aktuella inom området för upptäckt av sjukdomar.

Den slutliga avkodningen visar om det finns spår av genen närvaron av patogenen i levercellerna.

Om alla principer följs under forskningen är resultatet absolut noggrant. Metoden används för diagnos, används i behandlingsprocessen och i antiviral terapi.

1. En högkvalitativ PCR på totalen har endast två betydelser: "detekterade" och "ej detekterade". Förfarandet utförs för varje patient med misstänkt hepatit. Med en genomsnittlig känslighet för PCR-testet i intervallet från 10 till 500 IE / ml, med låga nivåer av virus-DNA i blodet, kommer ingen genmaterial att detekteras.
2. Kvantitativ PCR. I motsats till det kvalitativa indikerar det inte bara hepatit B. Kvantitativ analys indikerar hur långt normen hos en frisk person ligger långt ifrån patientens indikatorer i numeriska termer. Metoden gör det möjligt att bedöma sjukdomsfasen och förskriva behandling. Känsligheten hos PCR-testet i kvantitativt följd är högre än i den kvalitativa metoden. Basen är räkningen av det detekterade DNA som uttrycks i kopior per milliliter eller IE / ml.

Dessutom ger kvantitativ PCR inblick i effekterna av behandlingen och korrektheten hos den valda terapin. Beroende på mängden virusgenmaterial kan ett beslut fattas för att förkorta behandlingens varaktighet eller omvänt att utvidga och stärka det.

Biokemiskt blodprov för hepatit B

Metoden för biokemisk analys krävs för att få en fullständig klinisk bild av sjukdomsförloppet. Denna diagnostiska metod ger en förståelse för de inre organens arbete (lever, njure, gallblåsa, sköldkörtel och andra). Dekodning ger en förståelse för ämnesomsättningen i kroppen, de möjliga metabolismen av patologi. Detaljerade indikatorer visar på brist på vitaminer, makronäringsämnen och mineraler som är nödvändiga för människors hälsa och liv.

Du kan ta ett test för hepatit hos något annat diagnostiskt center (Invitro, Gemotest, etc.). Biokemiskt blodprov för detektering av hepatit B innefattar följande komponenter.

Kvantitativ analys av enzymet ALT (AlAt)

Detta enzym finns oftast i förhöjda koncentrationer vid akut och kronisk hepatit. Ämnet finns i levercellerna och med organskador genom blodbanan går in i blodkärlen.

Mängden och koncentrationen i blodet under en virussjukdom förändras ständigt, så forskning genomförs minst en gång i kvartalet. ALT återspeglar inte bara aktiviteten hos hepatitviruset, men också graden av försämring som orsakas av det i levern. Nivån på ALT ökar med ökande mängder giftiga ämnen av hepatiskt ursprung och i närvaro av viruset.

Kvantitativ analys av AST-enzym

Protein är en del av människans viktigaste organ: lever, nervvävnad, njurevävnad, skelett och muskler. Enzymet är inblandat i att bygga den viktigaste muskeln - hjärtat. Hög AST hos en patient med hepatit B kan signalera leverfibros. En liknande situation uppstår när alkohol, droger eller annan giftig skada på levercellerna.

Överhettningsindikatorer är ett tecken på leverskador på mobilnivån. Vid diagnos är det nödvändigt att ta hänsyn till förhållandet mellan AST och ALT (de Rytis-koefficienten). En samtidig ökning av koncentrationen av båda enzymerna är ett tecken på levernekros.

bilirubin

Ämnet bildas i mjälten och leveren som ett resultat av nedbrytningen av hemoglobin i deras vävnader. Denna komponent är en del av gallan. Det finns två proteinfraktioner: Direkt bilirubin (bunden) och indirekt bilirubin (fri). Med en ökning av blodbunden bilirubin är det vettigt att misstänka hepatit eller annan leverskada. Detta är direkt relaterat till cytolysen av leverceller.

Om mängden indirekt bilirubin ökar, är det troligtvis en skada av parenkymvävnad eller Gilberts syndrom. Den höga nivån av bilirubin enligt resultaten av analysen kan vara en följd av obstruktion av gallkanalerna. När bilirubin nivåer över 30 mikromol per liter hos patienten verkar fördomsfull skiftning på huden blir urin mörkt och ögonvitor ändra färg.

albumin

Syntes av detta protein förekommer i levern. Om dess mängd minskas, indikerar detta en minskning av syntesen av enzymer i kroppen på grund av förekomsten av svåra lesioner i levercellerna.

Totalt protein

Om mängden totalt protein blir signifikant lägre än den accepterade normen, indikerar detta en avmattning i leverens funktion.

GGT (GGTP)

Ett enzym som används vid detektering av obstruktiv gulsot och cholecystit. En ökning av GGT-nivån är en signal om giftig leverskade. Kan provoceras av kronisk alkoholism och okontrollerad användning av droger. Protein är särskilt känsligt för toxiner och alkohol, under deras inflytande växer sin aktivitet snabbt. Att upprätthålla en hög koncentration av GGT i blodet under en lång tid talar om svår leverskada.

kreatinin

Det är en produkt av proteinmetabolism som uppträder i levern. En kraftig nedgång i nivån är en signal som orgeln saktar ner

Proteinfraktioner

En minskning av nivån av proteinfraktioner är ett tecken på leversjukdom.

Dekodningsanalys för hepatit B och värden är normala

Diagnostiserande hepatit B är en kumulativ studie av indikatorer. Endast deras omfattande analys gör det möjligt att dra slutsatser om patientens infektion. Tänk på avkodningsanalysen för hepatit B. För jämförelse, halten av ämnen i blodet.

Dekryptera blodprov för hepatit B

I den medicinska världen anses hepatit B vara en av de farligaste i vår tid.

Det här viruset kan överföra vid kontakt med infekterat blod - det kan vara en sax för nagelkammaren i nagelsalongen, medicinska instrument, speciellt instrument för tandläkare som inte genomgått den nödvändiga steriliseringen, eller det utfördes inte på ett tillförlitligt sätt. Dessutom är viruset sexuellt överfört.

För att fastställa sjukdomen för hepatit B måste patienten ta blod för analys.

Som beskrivet ovan kan viruset överföras sexuellt, genom hushållen, det tillhör den hematogena typen av spridning. När infekterat kommer viruset in i levercellerna, och därifrån börjar spridas genom hela kroppen. Viruset sprider sig genom cirkulationssystemet, det är extremt resistent mot temperaturen och behåller sin förmåga att skada levande celler.

Vilka blodprov har du för hepatit B?

Om en person har upplevt de första symptomen på hepatit B-sjukdom, ska du omedelbart kontakta en läkare och bli testad. Vid undersökning av en patient tas blod för att testa det. Blod tas på tom mage, den sista måltiden ska vara minst 8 timmar sedan.

För att fastställa närvaron av sjukdomen i människokroppen är det nödvändigt att göra tre typer blodprov:

• Polymeraskedjereaktion kommer att visa om det finns HBV-DNA i celler;
• Undersök närvaron av protein och antigen i patientens blod;
• Analyser om närvaron av protein kommer att indikera en exacerbation av sjukdomen.

Läkare utför ofta kliniska tester på flera markörer för att få en fullständig bild av sjukdomen.

Immunologiska tester för hepatit B

Under denna tidsperiod är immunologiska tester för hepatit B pålitliga. Testerna syftar till att detektera antikroppar i blodet som bildas i levern. Typiskt innebär testning av hepatit B att dekodera de samlade data för individuella proteinceller. Under provet var uppmärksam på sådana antikroppar:

• HBsAg - de kan ofta hittas i början av infektionen, även innan sjukdomen ger vägen att veta. En positiv markör indikerar att personen är infekterad, även om det har funnits fall av positivt resultat hos en helt frisk person. Resultaten är negativa när det inte finns mer än 0,05 IE / ml i patientens kropp, med en högre antikroppskoncentration - analysen är positiv.
• HBeAg - dessa antikroppar återfinns i nästan alla infekterade patienter. Med långvarig hög koncentration av antikroppar i blodet blir sjukdomen en kronisk form. En positiv markör innebär förhöjning av sjukdomen. Närvaron av den ovannämnda antikroppen i patientens kropp indikerar att sjukdomen fortskrider och kommer till en topp.
• Anti-HBc har två typer av antikroppar - l gG och lgM. Förekomsten av antikroppar Ig i blodet tyder på att sjukdomen kommer till sin högsta punkt och kan omvandlas till en kronisk form. Läkare måste se till att denna antikropp inte ökar blodtalet. Lyckligtvis är lgG bra, det betyder bildandet av immunitet mot hepatit B-viruset.
• Anti-HBe-antikroppen säger att sjukdomen fortskrider på normalt sätt och immunitet mot hepatit B bildas i patientens kropp.
• Anti-HBs - det betyder att patienten är frisk och hans immunsystem är signifikant starkare.

HBV-DNA-detektion med PCR

För en klinisk studie som hjälper till att avgöra om en patient är infekterad med hepatit B-viruset, välj CRC-metoden. PCR står för polymeras kedjereaktion, genom att studera det kan du bestämma närvaron av ett virus i kroppen.

Resultaten av studien bidrar till att bestämma närvaron av en genpatogen i levercellerna. Med korrekt förfarande anses resultaten vara pålitliga.

• Högkvalitativt RPC-positivt eller negativt resultat. Denna procedur är obligatorisk för alla patienter med misstänkt infektion med hepatit B. Om det finns virus i små mängder i DNA-cellerna, kommer det inte att detekteras.
• Kvantitativ RPC. Denna studie visar inte bara närvaron eller frånvaron av viruset utan även infektionssteget. Genom att bestämma sjukdomsfasen kan du tilldela den medicinska behandlingen som krävs.

Bland annat hjälper ROC att noggrant ordinera behandling och justera dosen av droger. Behandlingsbehandlingens varaktighet bestäms också, i vissa fall kan den avslutas före tid, och andra patienter behöver en ytterligare kurs av rehabilitering.

Biokemiskt blodprov för hepatit B

För att göra hela bilden av infektion och sjukdomsförloppet är det nödvändigt att göra ett biokemiskt blodprov. Denna studie kommer att bidra till att bestämma tillståndet hos patientens inre organ och hur de fungerar. Analyser ger en allmän bild av de metaboliska processerna i kroppen, och talar också om metabolisk hastighet.

Biokemisk analys kommer också att indikera alla vitaminer och spårämnen som är nödvändiga för kroppens normala kamp mot sjukdomen och för att stärka immunförsvaret.

Hepatit B-tester kan tas vid någon klinik, privat eller offentligt. När ett hepatit B-virus detekteras i människokroppen, genom biokemisk analys finns sådana komponenter.

Kvantitativ analys av enzymet ALT (AlAt)

Detta enzym kan hittas i höga koncentrationer, med utveckling eller kronisk form av infektion med hepatit B-viruset. Enzymet finns i leverns celler och på grund av blodbanan sprider sig genom alla kärl.

Koncentrationen av substansen i kroppen förändras ständigt på grund av vad som ska genomföras analyser en gång i kvartalet. Tack vare ALT är det möjligt att undersöka inte bara virusets aktivitet utan också bedöma omfattningen av dess negativa effekt på levern och organismen som helhet.

Kvantitativ analys av AST-enzym

Protein är en av de viktigaste substanserna i människokroppen, alla vitala organ är byggda från det, inklusive hjärtat. Med hepatit B-sjukdom indikerar en hög AST-hastighet leverfibros.

Höga hastigheter indikerar destruktion av leverceller. För den slutliga diagnosen bör förhållandet mellan AST och ALT övervägas. Med en hög koncentration av båda enzymerna utvecklas levernekros.

bilirubin

Hemoglobin bryts ner i leverns och mjältevävnad, tack vare vilket ett ämne som bilirubin uppträder. Denna komponent är grunden för gallan. Bilirubin kan vara direkt och indirekt. Med en hög koncentration av direkt bilirubin i blodet är det möjligt att etablera infektion med hepatit B eller andra leversjukdomar.

En hög koncentration av icke-direkt bilirubin i blodet talar om Gilberts syndrom. Dessutom signalerar en hög koncentration av något bilirubin en dålig patency av gallkanalerna. Vid infektion med hepatit blir urinen mörk, ögonens ansikte och vita blir gula.

albumin

Albumin är ett protein som syntetiseras i levern. Med låga halter av detta protein i kroppen är leverceller skadade.

Totalt protein

Minskningen i koncentrationen av totalt protein i patientens kropp indikerar en överträngning av levern.

GGT (GGTP)

Detta enzym används av läkare för att upptäcka gulsot eller cholecystit. Förhöjda nivåer av GGT indikerar toxisk skada på leverceller, som kan uppstå som ett resultat av kronisk alkoholism eller läkemedelsförgiftning. Protein är extremt känsligt för alkohol och toxiner, och när de är överdrivna ökar proteinets aktivitet.

kreatinin

Proteinmetabolism sker i levern, och produkten av denna metabolism i medicin kallas kreatinin. När kreatininnivån minskar kommer levern att sakta ner.

Proteinfraktioner

En låg nivå av proteinfraktioner indikerar en klar kränkning av levern.

Dekodningsanalys för hepatit B och värden är normala

För att diagnostisera ett virus är det nödvändigt att genomföra ett antal olika studier. Resultaten av alla tester i komplexet ger en tydlig bild av sjukdomen.

Kärnan i analysen av PCR för hepatit B och dess resultat

Viral hepatit B behandlas framgångsrikt om den detekteras i tid och antalet antikroppar och antigener i patientens blod bestäms korrekt. Med hjälp av en enzymimmunanalys för hepatit är det möjligt att upptäcka närvaron av virusmarkörer, men de kan inte bestämma det exakta stadiet av processen.

För kvantitativ utvärdering användes PCR-diagnostik. Med testet är det möjligt att räkna antalet markörer, förutse sjukdomsförloppet och sannolikheten för botemedel med hjälp av antivirala läkemedel.

Den största fördelen med studien är förmågan att upptäcka även minimala koncentrationer av viruset, för att identifiera patogenen vid artsteget.

Diagnos av hepatit B

Hepatit B-virus är mycket smittsamt och motståndskraftigt mot yttre påverkan. Den förblir aktiv i blodet hos en patient i flera veckor. Därför är varje person utsatt för infektion, även om profylax observeras.

För att diagnostisera sjukdomen förskriva följande studier:

Kärnan i PCR-metoden

Amerikanska kemisten K.Mullis fick Nobelpriset, och hans diagnostiska metod används fortfarande.

Förfader till PCR-metoden (polymeraskedjereaktion) anses vara en forskare från Norge H. Kleppe. Han började först utföra DNA-förstärkningen (återhämtning) genom att använda en kort DNA-kedja, det vill säga en syntetisk primer (ett slags kopia).

Men forskaren misslyckades med att förverkliga sin idé. Liknande studier gjordes av den amerikanska kemisten K.Mullis, som år 1993 tilldelades Nobelpriset för sin uppfinning. Sedan dess har PCR använts för att upprätta faderskap, diagnostisera genetiska sjukdomar och upptäcka virus.

Kärnan i reaktionen är att med hjälp av enzymer kopieras en viss bit DNA. Du kan bara kopiera området som motsvarar de angivna parametrarna och om det finns i det presenterade provet. Följande komponenter används för att starta reaktionen:

1. Matris DNA med en webbplats som ska kopieras.
2. Primers liknar struktur i DNA.
3. Polymeras, det vill säga enzymet som utlöser reaktionen. Det ska vara termostabil, det vill säga att motstå extremiteter i temperaturen.
4. Lösning med vissa parametrar, vilket säkerställer reaktionens genomgång.

Reaktionen utförs i flera steg:

För detektion av hepatit B används två typer av reaktioner: kvantitativa och kvalitativa.

Kvantitativ PCR

Den kvantitativa metoden bestämmer mängden av HBV genomet

Kvantitativ PCR innefattar samtidig skapande av kopior av DNA-fragment och bestämning av antalet molekyler. Mätningen utförs efter varje steg, det vill säga i realtid. Detta uppnås genom att använda fluorescerande sonder, vilka ingår i en kedja av molekyler och glöd under en viss period av studien.

Denna metod används för att detektera DNA-fragment som är markörer av hepatitviruset. Med hjälp av den kvantitativa metoden är det möjligt att exakt isolera genotypen av viruset. Med andra ord beräknas antalet kopior av HBV-genomet per patientcellnummer.

Kvantitativ analys ger svar på följande frågor:

1. Med vilken intensitet utvecklar sjukdomen.
2. Hur effektiv är behandlingen.
3. Har läkemedelsresistens utvecklats?

Dessutom är kvantitativ mätning nödvändig för diagnos av det kroniska infektionsstadiet. Om mängden DNA ligger under 100 st / ml vid normal transaminasnivå, är personen en bärare av viruset.

I den akuta fasen är mängden antikroppar mycket högre. I antiviral terapi indikerar en ökning av antalet antikroppar utvecklingen av läkemedelsresistens, detta är en signal för att justera behandlingen.

Högkvalitativ PCR

Högkvalitativ PCR ger mindre information, men kan eliminera infektion.

PCR av hög kvalitet kan endast fastställa förekomsten av patogen i blodet. Om de är frånvarande är patienten inte infekterad, om patogen kommer in i blodet, blir resultatet positivt.

Men med hjälp av kvalitativ reaktion är det omöjligt att klargöra genomet av viruset, sjukdomsstadiet. Därför utförde diagnosen HBV både kvantitativ och kvalitativ mätning.

Förbereder sig för undersökningen

Venös blod krävs för PCR-analysen. Detta måste ske på morgonen på en tom mage.

Patienten ska korrekt förbereda sig för studien:

1. I 10 timmar att vägra mat kan du bara dricka rent vatten.
2. På kvällen för att sluta ta alkohol, i 4 timmar att inte röka.
3. Innan undersökningen bör undvikas fysisk och känslomässig stress.
4. Sluta använda medicinen i 2 dagar, om det inte är möjligt, är det nödvändigt att meddela laboratorie tekniker. Vissa läkemedel påverkar slutresultatet.

Tolkning av data

I en kvantitativ reaktion utvärderas de erhållna indikatorerna beroende på antalet DNA-kopior.

Det är lätt att tolka kvalitetsmätningsdata. Han ger antingen ett positivt eller negativt svar.

I en kvantitativ reaktion är det möjligt att utvärdera de erhållna indikatorerna beroende på antalet DNA-kopior. Måttenhet är kopior / ml.

Data avkodas enligt följande:

1. Om mängden HBV-DNA är mindre än 90, är ​​infektionen frånvarande. Patienten utvecklade immunitet efter immunisering, eller han var botad av sjukdomen.
2. När antalet kopior 2x100 pratar om virusets bärare.
3. Antalet 2x106 indikerar ett kroniskt stadium av sjukdomen.
4. Med DNA mer än 2x109 har patienten ett akut stadium av hepatit.

Felaktiga resultat

Fördelarna med den diagnostiska metoden med användning av polymerasreaktioner är som följer:

1. Direkt detektering av patogener. I motsats härtill tillhandahåller ELISA information om närvaron av antikroppar mot viruset.
2. Specificitet. Det vill säga det är DNA-regionen som är närvarande i biomaterialprovet som kopieras.
3. Överkänslighet. Metoden kan även detektera enskilda cellfragment.
4. Diagnos av sjukdomar i akuta och latenta skeden. Det är, det är möjligt att diagnostisera sjukdomen vid scenen av prekliniska manifestationer.

Metoden har brister som leder till falska resultat. Den viktigaste nackdelen är sannolikheten för kontaminering av materialet. Den främsta källan till förorening är dåligt bearbetade rör, laboratoriehänder, reagenser.

En del av DNA från en tidigare reaktion kan komma in i blodet. Därför påläggs laboratorierna ökade hygienkrav: separata rum, plaströr, ultraviolett behandling av laboratorier etc.

Falska negativa resultat kan bero på minskad känslighet av reaktionen. Detta händer i följande situationer:

• patienten tar mediciner, till exempel antikoagulantia;
• personen drabbades av fysisk stress före analysen (spelar sport, hårt arbete);
• infektion har inträffat nyligen.

Om patienten har en hög sannolikhet för infektion, och resultatet av studien är negativt, behöver han ses över.

Se även:

slutsats

Polymeraskedjereaktionsmetoden är den viktigaste och mest informativa för diagnosen av HBV. Det gör det inte bara möjligt att fastställa infektionens bärarstatus, men också för att klargöra sjukdomsfasen, för att utvärdera resultaten av behandlingen.

För en mer noggrann diagnos används en kvalitativ och kvantitativ mätning. Nackdelarna med metoden innefattar sannolikheten för kontaminering, reducerad känslighet och ett ganska högt pris.

För att resultaten ska vara mest tillförlitliga bör man ordentligt förbereda sig för studien och genomföra den i kliniken med lämplig licens och gott rykte.